紅景天苷（Salidroside）是一種具有多種生物活性（如抗疲勞、抗缺氧、抗氧化）的珍貴苷類化合物龙8-long8·(国际)唯一官方网站B·体育【中国官】B-sports登录入口，市場需求大PG(中国电子)股份有限公司-PG智能科技智慧平台。目前紅景天苷主要從珍稀植物紅景天中直接提萂K(体育科技有限公司)体育·官方网站。�資源有限球客岛-专业体育赛事直播资讯平台MK(体育科技有限公司)体育·官方网站K8凯发就来凯发集团【官网】天生赢家一触即发。通過合成生物學在微生物中生産是替代方案杏耀_杏耀娱乐登录_杏耀注册代理平台官网球客岛-专业体育赛事直播资讯平台PG(中国电子)股份有限公司-PG智能科技智慧平台，但需要找到高效、特異性強的糖基轉移酶（UGT）龙8-long8·(国际)唯一官方网站PG(中国电子)股份有限公司-PG智能科技智慧平台。植物基因組中含有大量UGT基因EON4-意昂4凯捷「强保障平台,更省心注册」B·体育【中国官】B-sports登录入口，但通過傳統的序列比對和共表達分析進行功能鑒定費時費力EON4-意昂4凯捷「强保障平台,更省心注册」K8凯发就来凯发集团【官网】天生赢家一触即发龙8-long8·(国际)唯一官方网站。

2025年2月EON4-意昂4凯捷「强保障平台,更省心注册」MK(体育科技有限公司)体育·官方网站，武漢大學藥學院、中南醫院藥學研究院魯麗課題組杏耀_杏耀娱乐登录_杏耀注册代理平台官网EON4-意昂4凯捷「强保障平台,更省心注册」龙8-long8·(国际)唯一官方网站，發表了基于預測蛋白結構的虛擬篩選高效挖掘植物糖基轉移酶的文章K8凯发就来凯发集团【官网】天生赢家一触即发，該研究成功開發並驗證了一套結合全長轉錄組測序与結構虛擬篩選的高效方法龙8-long8·(国际)唯一官方网站尼斯人app官网下载官方版(中国)官方网站，從一個未被充分研究的草本植物落新婦（Astilbe chinensis） 中球友直播,球友体育,球友足球直播,球友体育直播龙8-long8·(国际)唯一官方网站杏耀_杏耀娱乐登录_杏耀注册代理平台官网，快速鑒定出能夠高效催化合成珍貴天然産物紅景天苷的糖基轉移酶（UGT）球客岛-专业体育赛事直播资讯平台EON4-意昂4凯捷「强保障平台,更省心注册」，並深入揭示了其催化機制和底物選擇性的結構基礎球友直播,球友体育,球友足球直播,球友体育直播。該成果發表在期刊Plant Biotechnology Journal上尼斯人app官网下载官方版(中国)官方网站球友直播,球友体育,球友足球直播,球友体育直播，文章題目“Structure-based virtual screening aids the identification of glycosyltransferases in the biosynthesis of salidroside”尼斯人app官网下载官方版(中国)官方网站。諾禾致源爲本研究提供了全長轉錄組相關建庫測序服務PG(中国电子)股份有限公司-PG智能科技智慧平台K8凯发就来凯发集团【官网】天生赢家一触即发。

主要結論

1.通過整合轉錄組測序和虛擬篩選來表征候選UGT

文章利用PacBio（長读長）和Illumina（短读長）混合測序球友直播,球友体育,球友足球直播,球友体育直播，爲这种缺乏基因組信息的植物（落新妇）構建了高质量的全長轉錄組EON4-意昂4凯捷「强保障平台,更省心注册」K8凯发就来凯发集团【官网】天生赢家一触即发B·体育【中国官】B-sports登录入口。从中鑒定出82个UGT基因龙8-long8·(国际)唯一官方网站尼斯人app官网下载官方版(中国)官方网站，通過差异表达基因分析篩選出49个在根茎中高表达的候選基因尼斯人app官网下载官方版(中国)官方网站K8凯发就来凯发集团【官网】天生赢家一触即发。使用RoseTTAFold预測了49个候選UGT的三维結構B·体育【中国官】B-sports登录入口龙8-long8·(国际)唯一官方网站。通過与其他已知UGT晶体結構（Bc7OUGT）比对B·体育【中国官】B-sports登录入口，确定了糖供体（UDP-葡萄糖）的結合位置B·体育【中国官】B-sports登录入口杏耀_杏耀娱乐登录_杏耀注册代理平台官网，并据此定义了邻近的底物結合口袋球客岛-专业体育赛事直播资讯平台K8凯发就来凯发集团【官网】天生赢家一触即发。使用AutoDock Vina将底物酪醇（Tyrosol） 对接到每个UGT的预測結構中龙8-long8·(国际)唯一官方网站PG(中国电子)股份有限公司-PG智能科技智慧平台尼斯人app官网下载官方版(中国)官方网站。通過进一步分析UGT的關鍵催化His殘基、糖供体和糖受体之間的距离和角度杏耀_杏耀娱乐登录_杏耀注册代理平台官网PG(中国电子)股份有限公司-PG智能科技智慧平台EON4-意昂4凯捷「强保障平台,更省心注册」，篩選到Ach15909, Ach17173, Ach16750 三个最优候選基因EON4-意昂4凯捷「强保障平台,更省心注册」龙8-long8·(国际)唯一官方网站MK(体育科技有限公司)体育·官方网站。

圖1 基于全長轉錄組的糖基轉移酶基因篩選

圖2 基于結構的糖基轉移酶虛擬篩選

2.酶學特性和關鍵殘基鑒定

通過在大肠杆菌中异源表达蛋白杏耀_杏耀娱乐登录_杏耀注册代理平台官网龙8-long8·(国际)唯一官方网站，证实Ach15909和Ach16750能催化合成红景天苷MK(体育科技有限公司)体育·官方网站球客岛-专业体育赛事直播资讯平台B·体育【中国官】B-sports登录入口，且Ach15909活性最高（接近100%轉化率）MK(体育科技有限公司)体育·官方网站球客岛-专业体育赛事直播资讯平台。以酪醇爲底物MK(体育科技有限公司)体育·官方网站B·体育【中国官】B-sports登录入口龙8-long8·(国际)唯一官方网站，測量了Ach15909的催化和动力學参数MK(体育科技有限公司)体育·官方网站尼斯人app官网下载官方版(中国)官方网站，在已报道的具有相同功能的酶中PG(中国电子)股份有限公司-PG智能科技智慧平台，其酶活性最高尼斯人app官网下载官方版(中国)官方网站B·体育【中国官】B-sports登录入口龙8-long8·(国际)唯一官方网站，同时測试了pH值、温度和金属离子对其催化活性的影响杏耀_杏耀娱乐登录_杏耀注册代理平台官网。通過分子对接模型和点突变实验PG(中国电子)股份有限公司-PG智能科技智慧平台，证实了 His22（催化碱基）、Gln403（氢鍵）、Phe400（π-π堆积） 是催化過程中的關鍵殘基杏耀_杏耀娱乐登录_杏耀注册代理平台官网。測试了60种不同底物K8凯发就来凯发集团【官网】天生赢家一触即发B·体育【中国官】B-sports登录入口杏耀_杏耀娱乐登录_杏耀注册代理平台官网，发现Ach15909偏好分子体积 < 150 Å的小分子底物尼斯人app官网下载官方版(中国)官方网站K8凯发就来凯发集团【官网】天生赢家一触即发杏耀_杏耀娱乐登录_杏耀注册代理平台官网。

圖3 Ach15909的功能表征和催化特性

3.Ach15909結構域間連接區域（linker）的功能

研究发现結構域連接區（Val256-Glu282） 具有高度柔性EON4-意昂4凯捷「强保障平台,更省心注册」K8凯发就来凯发集团【官网】天生赢家一触即发PG(中国电子)股份有限公司-PG智能科技智慧平台，它可能充当底物結合袋的入口MK(体育科技有限公司)体育·官方网站球客岛-专业体育赛事直播资讯平台龙8-long8·(国际)唯一官方网站。将Ach15909的連接區替换爲來自UGT85H2（PDB ID： 2PQ6）的連接區形成嵌合酶K8凯发就来凯发集团【官网】天生赢家一触即发球友直播,球友体育,球友足球直播,球友体育直播，結果显示尼斯人app官网下载官方版(中国)官方网站，其对原有小底物（如酪醇）的活性丧失或降低龙8-long8·(国际)唯一官方网站，但却获得了催化更大体积底物（如黄酮类）的能力球客岛-专业体育赛事直播资讯平台PG(中国电子)股份有限公司-PG智能科技智慧平台。表明連接區并非无功能的“铰链”球友直播,球友体育,球友足球直播,球友体育直播球客岛-专业体育赛事直播资讯平台B·体育【中国官】B-sports登录入口，它通過调节N端和C端結構域之間裂隙的大小和柔性EON4-意昂4凯捷「强保障平台,更省心注册」，直接控制了底物的识别和容纳范围球客岛-专业体育赛事直播资讯平台杏耀_杏耀娱乐登录_杏耀注册代理平台官网，是酶底物复杂性的關鍵决定因素MK(体育科技有限公司)体育·官方网站球客岛-专业体育赛事直播资讯平台。

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圖4 諾禾致源Kinnex全長轉錄組物种经验

表1 諾禾致源Kinnex全長轉錄組产出经验

 **拆分條數

參考文獻：

[1] Yao Y, Chen F, Wu C, Chang X, Cheng W, Wang Q, Deng Z, Liu T, Lu L. Structure-based virtual screening aids the identification of glycosyltransferases in the biosynthesis of salidroside. Plant Biotechnol J. 2025 May;23(5):1725-1735. doi: 10.1111/pbi.70002.