U8国际·[官方网]有限公司官网·(中国区)U8国际·[官方网]有限公司官网-翻譯組Ribo-seq送樣建議-諾禾致源

聲明：
實驗室不接收《人間傳染的病原微生物名錄》（點擊查看）的所有样品HOME-沐鸣娱乐「强保障平台,更省心注册」娱乐中心首页大厅,娱乐中心-大厅welcome。对于高毒性动植物等样品意昂体育·科技赋能场景,更省心娱乐，必须事先通过销售、客服或运营经理与諾禾致源技术人员联系熊猫体育【体育中国】直播平台官方网站熊猫体育「中国Panda」直播认证官方网站，确定无高致病性和传染性后才能寄送样品龙8·long8(国际)唯一官方网站-HOME熊猫体育「中国Panda」直播认证官方网站。
提取風險提示和注意事項：核酸提取質量與物種及組織部位、采集方法及保存狀態、提取方法及操作、實驗器材及環境等因素均有密不可分的聯系vsport-(中国区)官方网站，尤其是三代超長提取對樣本的要求更高long8·龙8·(国际版)头号玩家唯一官方网站入口意昂体育·科技赋能场景,更省心娱乐。組織提取時可能受到上下遊處理操作的影響HOME-杏鑫平台-杏鑫娱乐共创美好未来娱乐中心首页大厅,娱乐中心-大厅welcome，因此較難保證單次提取滿足質量要求娱乐中心首页大厅,娱乐中心-大厅welcomeHOME-沐鸣娱乐「强保障平台,更省心注册」HOME-杏鑫平台-杏鑫娱乐共创美好未来，客戶應在寄送組織樣品前進行備份熊猫体育「中国Panda」直播认证官方网站意昂体育·科技赋能场景,更省心娱乐HOME-杏鑫平台-杏鑫娱乐共创美好未来。爲了保障獲得高質量的核酸娱乐中心首页大厅,娱乐中心-大厅welcome熊猫体育【体育中国】直播平台官方网站vsport-(中国区)官方网站，請務必按照送樣手冊所規定的准備樣本娱乐中心首页大厅,娱乐中心-大厅welcome。對珍貴樣本或者微量樣本HOME-沐鸣娱乐「强保障平台,更省心注册」，建議自行提取熊猫体育【体育中国】直播平台官方网站。取樣過程中vsport-(中国区)官方网站，需要全程佩戴手套HOME-沐鸣娱乐「强保障平台,更省心注册」意昂体育·科技赋能场景,更省心娱乐，並且使用預冷乙醇對取樣器材進行擦拭消毒意昂体育·科技赋能场景,更省心娱乐，以免樣本汙染

1. 常见樣本類型

客戶分離的RPF(膠回收後的RNA)改爲：客戶分離的RPF(去除核糖體蛋白後的RNA片段)

2. 细胞类样本（不接未固定的细胞样本）

2.1 貼壁細胞

樣本類型

送樣量

保存/運輸

備注

貼壁細胞

5×10⁶HOME-沐鸣娱乐「强保障平台,更省心注册」龙8·long8(国际)唯一官方网站-HOME，細胞活性90%以上

凍存管分裝後液氮速凍；-80℃保存熊猫体育【体育中国】直播平台官方网站，幹冰運輸

需放線菌酮固定

樣本制備方法：
（1）培养貼壁細胞long8·龙8·(国际版)头号玩家唯一官方网站入口，细胞总量应为至少5×10⁶個long8·龙8·(国际版)头号玩家唯一官方网站入口龙8·long8(国际)唯一官方网站-HOME。吸出培養基球盟会·qmh(中国区)-官方网站意昂体育·科技赋能场景,更省心娱乐，加入新鮮培養基（含放線菌酮HOME-沐鸣娱乐「强保障平台,更省心注册」，終濃度0.1mg/ml）HOME-杏鑫平台-杏鑫娱乐共创美好未来，孵育1min；
（2）吸出培養基並將細胞置于冰上HOME-沐鸣娱乐「强保障平台,更省心注册」熊猫体育【体育中国】直播平台官方网站HOME-杏鑫平台-杏鑫娱乐共创美好未来。用10ml預冷的PBS（含放線菌酮long8·龙8·(国际版)头号玩家唯一官方网站入口，終濃度在0.1mg/ml）輕輕沖洗一次HOME-沐鸣娱乐「强保障平台,更省心注册」，吸幹液體；
（3）再加入1-2ml預冷的PBS（含放線菌酮熊猫体育「中国Panda」直播认证官方网站娱乐中心首页大厅,娱乐中心-大厅welcomelong8·龙8·(国际版)头号玩家唯一官方网站入口，終濃度0.1mg/ml）熊猫体育【体育中国】直播平台官方网站，側拿皿使之一定程度傾斜HOME-杏鑫平台-杏鑫娱乐共创美好未来，用一次性細胞刮刀輕輕刮下細胞HOME-沐鸣娱乐「强保障平台,更省心注册」，刮的時候順一個方向轉著刮熊猫体育【体育中国】直播平台官方网站意昂体育·科技赋能场景,更省心娱乐，集于底側；
（4）用1ml枪吸净置预冷1.5ml EP管内（一次吸不完可离心弃上清后再吸）；
（5）利用已預冷的4℃離心機收集細胞娱乐中心首页大厅,娱乐中心-大厅welcome熊猫体育「中国Panda」直播认证官方网站，500g離心5minHOME-杏鑫平台-杏鑫娱乐共创美好未来熊猫体育「中国Panda」直播认证官方网站意昂体育·科技赋能场景,更省心娱乐，吸棄上清球盟会·qmh(中国区)-官方网站，收集細胞；
（6）液氮速凍意昂体育·科技赋能场景,更省心娱乐vsport-(中国区)官方网站long8·龙8·(国际版)头号玩家唯一官方网站入口。-80℃暫存HOME-杏鑫平台-杏鑫娱乐共创美好未来意昂体育·科技赋能场景,更省心娱乐vsport-(中国区)官方网站，幹冰運輸娱乐中心首页大厅,娱乐中心-大厅welcome。
放線菌酮爲劇毒化合物HOME-杏鑫平台-杏鑫娱乐共创美好未来long8·龙8·(国际版)头号玩家唯一官方网站入口娱乐中心首页大厅,娱乐中心-大厅welcome，操作時注意做好防護意昂体育·科技赋能场景,更省心娱乐long8·龙8·(国际版)头号玩家唯一官方网站入口，處理後殘余物不要隨意丟棄娱乐中心首页大厅,娱乐中心-大厅welcomeHOME-沐鸣娱乐「强保障平台,更省心注册」。

若需裂解HOME-杏鑫平台-杏鑫娱乐共创美好未来熊猫体育【体育中国】直播平台官方网站HOME-沐鸣娱乐「强保障平台,更省心注册」，請按如下操作：
（1）所需試劑

試劑	儲存條件
細胞培養液	4 ℃
PBS	4 ℃
Polysome Buffer	4 ℃
10% Triton X-100	-20 ℃
100 mM DTT	-20 ℃
DNase I（1U/μl）	-20 ℃
50 mg/ml cycloheximide	-20 ℃

（2）配置裂解液（每个样本 1ml）HOME-杏鑫平台-杏鑫娱乐共创美好未来，4℃预冷熊猫体育【体育中国】直播平台官方网站。

試劑	體積（μl）	儲存條件
Polysome Buffer	878	4 ℃
10% Triton X-100	100	-20 ℃
100 mM DTT	10	-20 ℃
DNase I（1U/μl）	10	-20 ℃
50mg/ml cycloheximide	2	-20 ℃

（3）貼壁細胞裂解液制备
  1）培养貼壁細胞vsport-(中国区)官方网站HOME-沐鸣娱乐「强保障平台,更省心注册」HOME-杏鑫平台-杏鑫娱乐共创美好未来，细胞总量应为至少5×10⁶個vsport-(中国区)官方网站。吸出培養基意昂体育·科技赋能场景,更省心娱乐，加入新鮮培養基（含放線菌酮熊猫体育【体育中国】直播平台官方网站，終濃度0.1mg/ml）意昂体育·科技赋能场景,更省心娱乐龙8·long8(国际)唯一官方网站-HOMElong8·龙8·(国际版)头号玩家唯一官方网站入口，孵育1min龙8·long8(国际)唯一官方网站-HOMElong8·龙8·(国际版)头号玩家唯一官方网站入口球盟会·qmh(中国区)-官方网站。
  2）吸出培养基并将细胞置于冰上long8·龙8·(国际版)头号玩家唯一官方网站入口HOME-沐鸣娱乐「强保障平台,更省心注册」，用10ml 预冷的PBS（含放线菌酮球盟会·qmh(中国区)-官方网站，终濃度 0.1mg/ml）冲洗细胞熊猫体育【体育中国】直播平台官方网站HOME-杏鑫平台-杏鑫娱乐共创美好未来HOME-沐鸣娱乐「强保障平台,更省心注册」。
  3）吸出並棄掉PBS龙8·long8(国际)唯一官方网站-HOME，加入1ml裂解液至培養皿中使用細胞刮刀或者移液槍輕柔收集細胞long8·龙8·(国际版)头号玩家唯一官方网站入口vsport-(中国区)官方网站，並將其轉移至離心管中球盟会·qmh(中国区)-官方网站娱乐中心首页大厅,娱乐中心-大厅welcome。
  4）冰上孵育10min娱乐中心首页大厅,娱乐中心-大厅welcome，定時顛倒混勻vsport-(中国区)官方网站。
  5）4°C龙8·long8(国际)唯一官方网站-HOME娱乐中心首页大厅,娱乐中心-大厅welcome意昂体育·科技赋能场景,更省心娱乐，20000g 离心10min龙8·long8(国际)唯一官方网站-HOMEvsport-(中国区)官方网站意昂体育·科技赋能场景,更省心娱乐，将上清液转移至冰上预冷的新离心管中vsport-(中国区)官方网站意昂体育·科技赋能场景,更省心娱乐long8·龙8·(国际版)头号玩家唯一官方网站入口。
  6）使用裂解缓冲液校零后球盟会·qmh(中国区)-官方网站HOME-沐鸣娱乐「强保障平台,更省心注册」，测量裂解产物初濃度HOME-沐鸣娱乐「强保障平台,更省心注册」球盟会·qmh(中国区)-官方网站，初濃度≥500ng/μl熊猫体育【体育中国】直播平台官方网站，即可进行干冰送样龙8·long8(国际)唯一官方网站-HOME。

注意事項：
（1）需要使用放線菌酮進行固定後凍存送樣熊猫体育【体育中国】直播平台官方网站意昂体育·科技赋能场景,更省心娱乐long8·龙8·(国际版)头号玩家唯一官方网站入口，若要裂解送樣（需要使用裂解液意昂体育·科技赋能场景,更省心娱乐熊猫体育「中国Panda」直播认证官方网站HOME-沐鸣娱乐「强保障平台,更省心注册」，不接收研磨後的樣品）long8·龙8·(国际版)头号玩家唯一官方网站入口熊猫体育【体育中国】直播平台官方网站熊猫体育「中国Panda」直播认证官方网站，裂解液濃度需≥500ng/μl意昂体育·科技赋能场景,更省心娱乐球盟会·qmh(中国区)-官方网站，每個樣本按照300μl/管進行分裝vsport-(中国区)官方网站，幹冰送樣娱乐中心首页大厅,娱乐中心-大厅welcome熊猫体育「中国Panda」直播认证官方网站long8·龙8·(国际版)头号玩家唯一官方网站入口。
（2）同时进行轉錄組測序的意昂体育·科技赋能场景,更省心娱乐vsport-(中国区)官方网站HOME-杏鑫平台-杏鑫娱乐共创美好未来，请根据转录组送样要求另外准备样本long8·龙8·(国际版)头号玩家唯一官方网站入口。
（3）諾禾致源收到固定后的细胞样本熊猫体育「中国Panda」直播认证官方网站，会用含放线菌酮的裂解液对其进行再次固定vsport-(中国区)官方网站HOME-沐鸣娱乐「强保障平台,更省心注册」HOME-杏鑫平台-杏鑫娱乐共创美好未来，时间为20minHOME-沐鸣娱乐「强保障平台,更省心注册」。

2.2 懸浮細胞

樣本類型

送樣量

保存/運輸

備注

懸浮細胞

5×10⁶球盟会·qmh(中国区)-官方网站HOME-杏鑫平台-杏鑫娱乐共创美好未来vsport-(中国区)官方网站，細胞活性90%以上

凍存管分裝後液氮速凍；-80℃保存熊猫体育【体育中国】直播平台官方网站HOME-杏鑫平台-杏鑫娱乐共创美好未来，幹冰運輸

需放線菌酮固定

樣本制備方法：
（1）取至少5×10⁶個細胞龙8·long8(国际)唯一官方网站-HOMEvsport-(中国区)官方网站，500rpm離心5min龙8·long8(国际)唯一官方网站-HOMEHOME-杏鑫平台-杏鑫娱乐共创美好未来long8·龙8·(国际版)头号玩家唯一官方网站入口，棄上清娱乐中心首页大厅,娱乐中心-大厅welcome球盟会·qmh(中国区)-官方网站意昂体育·科技赋能场景,更省心娱乐。
（2）加入新鮮培養基（含放線菌酮熊猫体育【体育中国】直播平台官方网站，終濃度0.1mg/ml）long8·龙8·(国际版)头号玩家唯一官方网站入口熊猫体育「中国Panda」直播认证官方网站，輕柔吹吸混勻long8·龙8·(国际版)头号玩家唯一官方网站入口HOME-杏鑫平台-杏鑫娱乐共创美好未来球盟会·qmh(中国区)-官方网站，500rpm離心5min意昂体育·科技赋能场景,更省心娱乐，棄上清熊猫体育【体育中国】直播平台官方网站long8·龙8·(国际版)头号玩家唯一官方网站入口。
（3）加入1ml预冷的PBS（含放线菌酮HOME-沐鸣娱乐「强保障平台,更省心注册」意昂体育·科技赋能场景,更省心娱乐熊猫体育「中国Panda」直播认证官方网站，终濃度0.1mg/ml）HOME-沐鸣娱乐「强保障平台,更省心注册」long8·龙8·(国际版)头号玩家唯一官方网站入口，轻柔吹吸混匀vsport-(中国区)官方网站熊猫体育【体育中国】直播平台官方网站龙8·long8(国际)唯一官方网站-HOME，转移至预冷1.5ml EP管内熊猫体育「中国Panda」直播认证官方网站球盟会·qmh(中国区)-官方网站，500rpm离心5min意昂体育·科技赋能场景,更省心娱乐vsport-(中国区)官方网站HOME-沐鸣娱乐「强保障平台,更省心注册」，弃上清HOME-沐鸣娱乐「强保障平台,更省心注册」。
（4）500g球盟会·qmh(中国区)-官方网站，4℃HOME-杏鑫平台-杏鑫娱乐共创美好未来long8·龙8·(国际版)头号玩家唯一官方网站入口，離心5min龙8·long8(国际)唯一官方网站-HOME熊猫体育「中国Panda」直播认证官方网站，吸棄上清娱乐中心首页大厅,娱乐中心-大厅welcomeHOME-沐鸣娱乐「强保障平台,更省心注册」long8·龙8·(国际版)头号玩家唯一官方网站入口，收集細胞；
（5）液氮速凍龙8·long8(国际)唯一官方网站-HOME球盟会·qmh(中国区)-官方网站。-80℃暫存娱乐中心首页大厅,娱乐中心-大厅welcomeHOME-沐鸣娱乐「强保障平台,更省心注册」熊猫体育「中国Panda」直播认证官方网站，幹冰運輸娱乐中心首页大厅,娱乐中心-大厅welcome。
放線菌酮爲劇毒化合物熊猫体育【体育中国】直播平台官方网站vsport-(中国区)官方网站龙8·long8(国际)唯一官方网站-HOME，操作時注意做好防護vsport-(中国区)官方网站，處理後殘余物不要隨意丟棄long8·龙8·(国际版)头号玩家唯一官方网站入口意昂体育·科技赋能场景,更省心娱乐。

若需裂解龙8·long8(国际)唯一官方网站-HOMEvsport-(中国区)官方网站，請按如下操作：
（1）所需試劑

試劑	儲存條件
細胞培養液	4 ℃
PBS	4 ℃
Polysome Buffer	4 ℃
10% Triton X-100	-20 ℃
100 mM DTT	-20 ℃
DNase I（1U/μl）	-20 ℃
50mg/ml cycloheximide	-20 ℃

（2）配置裂解液（每个样本 1ml）熊猫体育「中国Panda」直播认证官方网站，4℃预冷娱乐中心首页大厅,娱乐中心-大厅welcome意昂体育·科技赋能场景,更省心娱乐。

試劑	體積（μl）	儲存條件
Polysome Buffer	878	4 ℃
10% Triton X-100	100	-20 ℃
100 mM DTT	10	-20 ℃
DNase I（1U/μl）	10	-20 ℃
50mg/ml cycloheximide	2	-20 ℃

（3）懸浮細胞裂解液制备
1）取至少5×10⁶個細胞娱乐中心首页大厅,娱乐中心-大厅welcome，800rpm離心5min熊猫体育「中国Panda」直播认证官方网站球盟会·qmh(中国区)-官方网站，棄上清意昂体育·科技赋能场景,更省心娱乐。
2）加入新鲜培养基（含放线菌酮vsport-(中国区)官方网站意昂体育·科技赋能场景,更省心娱乐，终濃度 0.1mg/m）熊猫体育「中国Panda」直播认证官方网站龙8·long8(国际)唯一官方网站-HOME，轻柔吹吸混匀熊猫体育【体育中国】直播平台官方网站HOME-沐鸣娱乐「强保障平台,更省心注册」long8·龙8·(国际版)头号玩家唯一官方网站入口，800rpm离心5min娱乐中心首页大厅,娱乐中心-大厅welcome意昂体育·科技赋能场景,更省心娱乐，弃上清熊猫体育「中国Panda」直播认证官方网站龙8·long8(国际)唯一官方网站-HOMEHOME-沐鸣娱乐「强保障平台,更省心注册」。
3）加入1ml预冷的 PBS（含放线菌酮HOME-沐鸣娱乐「强保障平台,更省心注册」龙8·long8(国际)唯一官方网站-HOME，终濃度 0.1mg/ml）娱乐中心首页大厅,娱乐中心-大厅welcome熊猫体育【体育中国】直播平台官方网站vsport-(中国区)官方网站，轻柔吹吸混匀龙8·long8(国际)唯一官方网站-HOMEHOME-杏鑫平台-杏鑫娱乐共创美好未来long8·龙8·(国际版)头号玩家唯一官方网站入口，800rpm离心5minHOME-沐鸣娱乐「强保障平台,更省心注册」，弃上清long8·龙8·(国际版)头号玩家唯一官方网站入口熊猫体育【体育中国】直播平台官方网站HOME-沐鸣娱乐「强保障平台,更省心注册」。
4）加入1ml裂解液long8·龙8·(国际版)头号玩家唯一官方网站入口熊猫体育【体育中国】直播平台官方网站HOME-沐鸣娱乐「强保障平台,更省心注册」，輕柔吹吸混勻；後冰上孵育10min娱乐中心首页大厅,娱乐中心-大厅welcomeHOME-沐鸣娱乐「强保障平台,更省心注册」，定時顛倒混勻龙8·long8(国际)唯一官方网站-HOME球盟会·qmh(中国区)-官方网站。
5）4°CHOME-沐鸣娱乐「强保障平台,更省心注册」vsport-(中国区)官方网站，20000g離心10min娱乐中心首页大厅,娱乐中心-大厅welcome，將上清液轉移至冰上預冷的新離心管中HOME-沐鸣娱乐「强保障平台,更省心注册」意昂体育·科技赋能场景,更省心娱乐HOME-杏鑫平台-杏鑫娱乐共创美好未来。
6）使用裂解緩沖液校零後HOME-沐鸣娱乐「强保障平台,更省心注册」，測量裂解産物初濃度vsport-(中国区)官方网站龙8·long8(国际)唯一官方网站-HOMElong8·龙8·(国际版)头号玩家唯一官方网站入口，初濃度≥500ng/μl龙8·long8(国际)唯一官方网站-HOME球盟会·qmh(中国区)-官方网站，即可進行幹冰送樣娱乐中心首页大厅,娱乐中心-大厅welcome。

注意事項：
（1）需要使用放線菌酮進行固定後凍存送樣vsport-(中国区)官方网站熊猫体育【体育中国】直播平台官方网站，若要裂解送樣（需要使用裂解液熊猫体育【体育中国】直播平台官方网站HOME-杏鑫平台-杏鑫娱乐共创美好未来意昂体育·科技赋能场景,更省心娱乐，不接收研磨後的樣品）娱乐中心首页大厅,娱乐中心-大厅welcome，裂解液濃度需≥500ng/μl娱乐中心首页大厅,娱乐中心-大厅welcome熊猫体育「中国Panda」直播认证官方网站，每個樣本按照300μl/管進行分裝vsport-(中国区)官方网站球盟会·qmh(中国区)-官方网站，幹冰送樣意昂体育·科技赋能场景,更省心娱乐vsport-(中国区)官方网站long8·龙8·(国际版)头号玩家唯一官方网站入口。
（2）同时进行轉錄組測序的意昂体育·科技赋能场景,更省心娱乐，请根据转录组送样要求另外准备样本long8·龙8·(国际版)头号玩家唯一官方网站入口龙8·long8(国际)唯一官方网站-HOME意昂体育·科技赋能场景,更省心娱乐。
（3）諾禾致源收到固定后的细胞样本熊猫体育「中国Panda」直播认证官方网站娱乐中心首页大厅,娱乐中心-大厅welcome，会用含放线菌酮的裂解液对其进行再次固定熊猫体育【体育中国】直播平台官方网站球盟会·qmh(中国区)-官方网站，时间为20minHOME-沐鸣娱乐「强保障平台,更省心注册」long8·龙8·(国际版)头号玩家唯一官方网站入口。

3. 動物組織

樣本類型

送樣量

保存/運輸

備注

動物組織

≥300mg

冰上分割小塊熊猫体育【体育中国】直播平台官方网站，分管備份；液氮速凍龙8·long8(国际)唯一官方网站-HOME熊猫体育「中国Panda」直播认证官方网站HOME-杏鑫平台-杏鑫娱乐共创美好未来，-80℃保存熊猫体育「中国Panda」直播认证官方网站，幹冰運輸

選用新鮮采集的樣本HOME-沐鸣娱乐「强保障平台,更省心注册」vsport-(中国区)官方网站，優先選擇核酸含量高的部位球盟会·qmh(中国区)-官方网站long8·龙8·(国际版)头号玩家唯一官方网站入口，冰上取樣vsport-(中国区)官方网站，建議送備份

樣本制備方法：
（1）動物組織取材后用预冷的RNase-free水冲洗HOME-沐鸣娱乐「强保障平台,更省心注册」意昂体育·科技赋能场景,更省心娱乐HOME-杏鑫平台-杏鑫娱乐共创美好未来，去除血渍和污物球盟会·qmh(中国区)-官方网站HOME-沐鸣娱乐「强保障平台,更省心注册」，并剔除非研究所需的组织long8·龙8·(国际版)头号玩家唯一官方网站入口vsport-(中国区)官方网站意昂体育·科技赋能场景,更省心娱乐，吸干水渍；
（2）冰上操作意昂体育·科技赋能场景,更省心娱乐龙8·long8(国际)唯一官方网站-HOME娱乐中心首页大厅,娱乐中心-大厅welcome，將組織切小塊（厚度小于0.5cm）HOME-杏鑫平台-杏鑫娱乐共创美好未来，放入已標記好的旋蓋凍存管中意昂体育·科技赋能场景,更省心娱乐vsport-(中国区)官方网站，迅速浸入液氮中速凍至少1h娱乐中心首页大厅,娱乐中心-大厅welcome熊猫体育【体育中国】直播平台官方网站熊猫体育「中国Panda」直播认证官方网站，然後保存于-80℃冰箱球盟会·qmh(中国区)-官方网站，以避免實驗操作前樣本降解；幹冰運輸熊猫体育「中国Panda」直播认证官方网站。
（3）爲確保實驗的順利娱乐中心首页大厅,娱乐中心-大厅welcome熊猫体育「中国Panda」直播认证官方网站vsport-(中国区)官方网站，建議樣本備份1-2份龙8·long8(国际)唯一官方网站-HOMEHOME-沐鸣娱乐「强保障平台,更省心注册」，每份至少＞300mglong8·龙8·(国际版)头号玩家唯一官方网站入口，以防部分樣品降解重新取材long8·龙8·(国际版)头号玩家唯一官方网站入口熊猫体育「中国Panda」直播认证官方网站HOME-沐鸣娱乐「强保障平台,更省心注册」，制備或送樣球盟会·qmh(中国区)-官方网站。

動物組織裂解（建议送组织vsport-(中国区)官方网站HOME-沐鸣娱乐「强保障平台,更省心注册」，如送裂解产物需按如下流程获得）：
（1）所需試劑

試劑	儲存條件
Polysome Buffer	4 ℃
10% Triton X-100	-20 ℃
100 mM DTT	-20 ℃
DNase I（1U/μl）	-20 ℃
50mg/ml cycloheximide	-20 ℃

（2）配置裂解液（每个样本 1ml）龙8·long8(国际)唯一官方网站-HOME，4℃预冷熊猫体育【体育中国】直播平台官方网站HOME-杏鑫平台-杏鑫娱乐共创美好未来。

試劑	體積（μl）	儲存條件
Polysome Buffer	878	4 ℃
10% Triton X-100	100	-20 ℃
100 mM DTT	10	-20 ℃
DNase I（1U/μl）	10	-20 ℃
50mg/ml cycloheximide	2	-20 ℃

（3）動物組織裂解液制备
1）取0.3g 動物組織龙8·long8(国际)唯一官方网站-HOME娱乐中心首页大厅,娱乐中心-大厅welcome，液氮充分研磨至粉末状（一定要研磨充分球盟会·qmh(中国区)-官方网站意昂体育·科技赋能场景,更省心娱乐龙8·long8(国际)唯一官方网站-HOME，利于后期的裂解）HOME-沐鸣娱乐「强保障平台,更省心注册」。
2）研缽中加入2ml的裂解液意昂体育·科技赋能场景,更省心娱乐vsport-(中国区)官方网站娱乐中心首页大厅,娱乐中心-大厅welcome，輕柔吹打HOME-沐鸣娱乐「强保障平台,更省心注册」，用移液槍將裂解液轉移至離心管中球盟会·qmh(中国区)-官方网站。
3）冰上孵育10min熊猫体育【体育中国】直播平台官方网站HOME-杏鑫平台-杏鑫娱乐共创美好未来，並定時顛倒混勻意昂体育·科技赋能场景,更省心娱乐熊猫体育【体育中国】直播平台官方网站。
4）4°C球盟会·qmh(中国区)-官方网站娱乐中心首页大厅,娱乐中心-大厅welcome，20000g離心10min球盟会·qmh(中国区)-官方网站龙8·long8(国际)唯一官方网站-HOME，將上清液轉移至冰上預冷的新離心管中熊猫体育【体育中国】直播平台官方网站娱乐中心首页大厅,娱乐中心-大厅welcomevsport-(中国区)官方网站。
5）使用裂解緩沖液校零後龙8·long8(国际)唯一官方网站-HOMEHOME-杏鑫平台-杏鑫娱乐共创美好未来熊猫体育【体育中国】直播平台官方网站，測量裂解産物初濃度熊猫体育【体育中国】直播平台官方网站HOME-沐鸣娱乐「强保障平台,更省心注册」，初濃度≥500ng/μl娱乐中心首页大厅,娱乐中心-大厅welcome龙8·long8(国际)唯一官方网站-HOME，即可進行幹冰送樣
注：裂解前超純水快速清洗組織2次意昂体育·科技赋能场景,更省心娱乐。

注意事項：
（1）組織樣本裂解前意昂体育·科技赋能场景,更省心娱乐，需使用超純淨水快速沖洗2遍；
（2）組織樣本建議直接凍存送樣：取新鮮組織熊猫体育「中国Panda」直播认证官方网站，每個樣本按照0.3g/管long8·龙8·(国际版)头号玩家唯一官方网站入口，切塊後液氮淬滅HOME-沐鸣娱乐「强保障平台,更省心注册」long8·龙8·(国际版)头号玩家唯一官方网站入口龙8·long8(国际)唯一官方网站-HOME，分裝熊猫体育「中国Panda」直播认证官方网站，幹冰送樣；
（3）裂解送樣（需要使用裂解液HOME-沐鸣娱乐「强保障平台,更省心注册」球盟会·qmh(中国区)-官方网站熊猫体育【体育中国】直播平台官方网站，不接收研磨後的樣品）HOME-杏鑫平台-杏鑫娱乐共创美好未来熊猫体育【体育中国】直播平台官方网站，裂解液濃度需≥500ng/μl球盟会·qmh(中国区)-官方网站HOME-杏鑫平台-杏鑫娱乐共创美好未来，每個樣本按照300μl/管進行分裝long8·龙8·(国际版)头号玩家唯一官方网站入口HOME-杏鑫平台-杏鑫娱乐共创美好未来，幹冰送樣vsport-(中国区)官方网站。
（4）若爲多組織取樣意昂体育·科技赋能场景,更省心娱乐，優先取易降解組織（肝/脾/胰髒等）龙8·long8(国际)唯一官方网站-HOME，每單個組織取完樣熊猫体育【体育中国】直播平台官方网站，應立刻液氮速凍保存！
（5）同时进行轉錄組測序的HOME-杏鑫平台-杏鑫娱乐共创美好未来，请根据转录组送样要求另外准备样本熊猫体育【体育中国】直播平台官方网站球盟会·qmh(中国区)-官方网站意昂体育·科技赋能场景,更省心娱乐。

4. 植物組織

樣本類型

送樣量

保存/運輸

備注

植物組織

≥300mg

冰上分割小塊球盟会·qmh(中国区)-官方网站熊猫体育【体育中国】直播平台官方网站熊猫体育「中国Panda」直播认证官方网站，分管備份；液氮速凍long8·龙8·(国际版)头号玩家唯一官方网站入口HOME-沐鸣娱乐「强保障平台,更省心注册」，-80℃保存long8·龙8·(国际版)头号玩家唯一官方网站入口vsport-(中国区)官方网站熊猫体育「中国Panda」直播认证官方网站，幹冰運輸

選用新鮮采集的樣本娱乐中心首页大厅,娱乐中心-大厅welcome，優先選擇核酸含量高的幼嫩部位long8·龙8·(国际版)头号玩家唯一官方网站入口娱乐中心首页大厅,娱乐中心-大厅welcomeHOME-沐鸣娱乐「强保障平台,更省心注册」，建議送備份

樣本制備方法：
（1）從植物體上取下研究所需的新鮮幼嫩、生長旺盛的組織龙8·long8(国际)唯一官方网站-HOMEHOME-沐鸣娱乐「强保障平台,更省心注册」long8·龙8·(国际版)头号玩家唯一官方网站入口，用預冷的RNase-free水將材料表面的灰塵或泥土沖洗幹淨vsport-(中国区)官方网站，吸幹；
（2）若組織體積較大HOME-沐鸣娱乐「强保障平台,更省心注册」HOME-杏鑫平台-杏鑫娱乐共创美好未来，應在冰上將其切成小塊或者薄片意昂体育·科技赋能场景,更省心娱乐，放入2ml或者更大體積的旋蓋凍存管中HOME-沐鸣娱乐「强保障平台,更省心注册」，標記好樣本名稱；
（3）迅速浸入液氮中速凍至少1h娱乐中心首页大厅,娱乐中心-大厅welcome，保存于-80℃冰箱熊猫体育【体育中国】直播平台官方网站HOME-沐鸣娱乐「强保障平台,更省心注册」，以避免實驗操作前樣本降解；幹冰運輸long8·龙8·(国际版)头号玩家唯一官方网站入口vsport-(中国区)官方网站龙8·long8(国际)唯一官方网站-HOME。
（4）爲確保實驗的順利HOME-杏鑫平台-杏鑫娱乐共创美好未来，建議樣本備份1-2份球盟会·qmh(中国区)-官方网站，每份至少＞300mgHOME-沐鸣娱乐「强保障平台,更省心注册」，以防部分樣品降解重新取材HOME-沐鸣娱乐「强保障平台,更省心注册」龙8·long8(国际)唯一官方网站-HOME熊猫体育【体育中国】直播平台官方网站，制備或送樣HOME-杏鑫平台-杏鑫娱乐共创美好未来HOME-沐鸣娱乐「强保障平台,更省心注册」熊猫体育「中国Panda」直播认证官方网站。

若需裂解娱乐中心首页大厅,娱乐中心-大厅welcomevsport-(中国区)官方网站龙8·long8(国际)唯一官方网站-HOME，請按如下操作：（建议送组织long8·龙8·(国际版)头号玩家唯一官方网站入口熊猫体育「中国Panda」直播认证官方网站vsport-(中国区)官方网站，如送裂解产物需按如下流程获得）
（1）植物組織 polysome buffer 配方

試劑	儲存條件
Tris-Cl pH 7.5	50mM
KCl	0.2mM
MgCl₂	15mM

（2）所需試劑

試劑	儲存條件
Polysome Buffer	4 ℃
10% Triton X-100	-20 ℃
β-巯基乙醇(20mM）	-20 ℃
DNase I（1U/μl）	-20 ℃
50mg/ml cycloheximide	-20 ℃

（3）配置裂解液（每个样本 1ml）HOME-杏鑫平台-杏鑫娱乐共创美好未来熊猫体育「中国Panda」直播认证官方网站，4℃预冷long8·龙8·(国际版)头号玩家唯一官方网站入口。

試劑	體積（μl）	儲存條件
Polysome Buffer	878	4 ℃
10% Triton X-100	100	-20 ℃
100 mM DTT	10	-20 ℃
DNase I（1U/μl）	10	-20 ℃
50mg/ml cycloheximide	2	-20 ℃

（4）植物組織裂解液制备
  1）取0.3g植物組織球盟会·qmh(中国区)-官方网站，液氮充分研磨至粉末状(一定要研磨充分娱乐中心首页大厅,娱乐中心-大厅welcome，以利于后期裂解）球盟会·qmh(中国区)-官方网站HOME-杏鑫平台-杏鑫娱乐共创美好未来。
  2）研缽中加入2ml裂解液vsport-(中国区)官方网站，輕柔吹打long8·龙8·(国际版)头号玩家唯一官方网站入口娱乐中心首页大厅,娱乐中心-大厅welcome，用移液槍將裂解液轉移至離心管中熊猫体育【体育中国】直播平台官方网站意昂体育·科技赋能场景,更省心娱乐HOME-杏鑫平台-杏鑫娱乐共创美好未来。
  3）冰上孵育10min熊猫体育「中国Panda」直播认证官方网站，定時顛倒混勻HOME-沐鸣娱乐「强保障平台,更省心注册」意昂体育·科技赋能场景,更省心娱乐。
  4）4°C意昂体育·科技赋能场景,更省心娱乐，20000g 离心10minvsport-(中国区)官方网站意昂体育·科技赋能场景,更省心娱乐熊猫体育「中国Panda」直播认证官方网站，将上清液转移至冰上预冷的新离心管中熊猫体育「中国Panda」直播认证官方网站vsport-(中国区)官方网站HOME-沐鸣娱乐「强保障平台,更省心注册」。
  5）使用裂解緩沖液校零後熊猫体育【体育中国】直播平台官方网站，測量裂解産物初濃度熊猫体育「中国Panda」直播认证官方网站HOME-杏鑫平台-杏鑫娱乐共创美好未来，初濃度≥500ng/μl熊猫体育「中国Panda」直播认证官方网站long8·龙8·(国际版)头号玩家唯一官方网站入口vsport-(中国区)官方网站，即可進行幹冰送樣vsport-(中国区)官方网站。
注：裂解前用超純水快速漂洗組織2次意昂体育·科技赋能场景,更省心娱乐。

注意事項：
（1）在取樣前龙8·long8(国际)唯一官方网站-HOMEHOME-杏鑫平台-杏鑫娱乐共创美好未来，請使用超純淨水沖洗球盟会·qmh(中国区)-官方网站意昂体育·科技赋能场景,更省心娱乐，保證無泥土等雜質汙染；
（2）植物組織建议直接冻存HOME-沐鸣娱乐「强保障平台,更省心注册」，分装HOME-杏鑫平台-杏鑫娱乐共创美好未来，用锡箔纸包裹long8·龙8·(国际版)头号玩家唯一官方网站入口龙8·long8(国际)唯一官方网站-HOME，干冰送样；
（3）裂解送样（需要使用裂解液熊猫体育【体育中国】直播平台官方网站HOME-沐鸣娱乐「强保障平台,更省心注册」，不接收研磨后的样品）vsport-(中国区)官方网站HOME-杏鑫平台-杏鑫娱乐共创美好未来HOME-沐鸣娱乐「强保障平台,更省心注册」，裂解液濃度需≥ 500ng/μl龙8·long8(国际)唯一官方网站-HOME，每个样本按照300μl/管进行分装long8·龙8·(国际版)头号玩家唯一官方网站入口熊猫体育【体育中国】直播平台官方网站vsport-(中国区)官方网站，干冰送样；
（4）同时进行轉錄組測序的娱乐中心首页大厅,娱乐中心-大厅welcomevsport-(中国区)官方网站，请按照转录组送样要求另外准备样本HOME-杏鑫平台-杏鑫娱乐共创美好未来。

5. 其他樣本類型

樣本類型	送樣量	保存/運輸	備注
RPFs	≥200ng/μlvsport-(中国区)官方网站，5μl以上	液氮速凍龙8·long8(国际)唯一官方网站-HOME，-80℃保存vsport-(中国区)官方网站HOME-杏鑫平台-杏鑫娱乐共创美好未来龙8·long8(国际)唯一官方网站-HOME，幹冰運輸	過柱法、蔗糖梯度離心收集或其他方式娱乐中心首页大厅,娱乐中心-大厅welcome。

6. 注意事项

Ribo-seq同時做轉錄組建庫娱乐中心首页大厅,娱乐中心-大厅welcome意昂体育·科技赋能场景,更省心娱乐vsport-(中国区)官方网站，請另外按照轉錄組送樣要求進行樣本的准備long8·龙8·(国际版)头号玩家唯一官方网站入口，不可使用同一管樣本建庫long8·龙8·(国际版)头号玩家唯一官方网站入口。
细胞与動物組織 polysome buffer 配方

試劑	濃度
Tris-Cl pH 7.5	20mM
NaCl	150mM
MgCl₂	5mM
DTT	1mM

7 样本打包及寄送建议

7.1 样本的打包
（1）核酸样品建议使用质量好的1.5ml或2ml 低吸附EP管装载样品球盟会·qmh(中国区)-官方网站HOME-沐鸣娱乐「强保障平台,更省心注册」娱乐中心首页大厅,娱乐中心-大厅welcome，并用封口膜封口意昂体育·科技赋能场景,更省心娱乐娱乐中心首页大厅,娱乐中心-大厅welcome熊猫体育【体育中国】直播平台官方网站。为了防止样品管破裂球盟会·qmh(中国区)-官方网站娱乐中心首页大厅,娱乐中心-大厅welcome，或者污染和混乱球盟会·qmh(中国区)-官方网站龙8·long8(国际)唯一官方网站-HOME娱乐中心首页大厅,娱乐中心-大厅welcome，请不要使用诸如PCR管、0.5ml EP管、八联管、96孔板、深孔板等非标准管送样意昂体育·科技赋能场景,更省心娱乐龙8·long8(国际)唯一官方网站-HOME熊猫体育「中国Panda」直播认证官方网站。非标准管不利于样品保存以及后续实验的进行熊猫体育【体育中国】直播平台官方网站球盟会·qmh(中国区)-官方网站。如有样品使用非标准管制备vsport-(中国区)官方网站球盟会·qmh(中国区)-官方网站，还请在送样前自行转管处理vsport-(中国区)官方网站龙8·long8(国际)唯一官方网站-HOME。
（2）组织样本建议根据送樣量使用合适规格带螺纹帽的EP管、冻存管或者离心管装载组织样品意昂体育·科技赋能场景,更省心娱乐HOME-杏鑫平台-杏鑫娱乐共创美好未来熊猫体育【体育中国】直播平台官方网站，并用封口膜封口long8·龙8·(国际版)头号玩家唯一官方网站入口。
（3）爲防止樣品管在運輸過程中受到幹冰擠壓破裂龙8·long8(国际)唯一官方网站-HOME，最好將樣品管放到50ml離心管或其他支撐物中HOME-杏鑫平台-杏鑫娱乐共创美好未来HOME-沐鸣娱乐「强保障平台,更省心注册」vsport-(中国区)官方网站，並在支撐物裏添加棉花或衛生紙緩沖娱乐中心首页大厅,娱乐中心-大厅welcome熊猫体育【体育中国】直播平台官方网站。大量樣品建議將EP管放置在凍存盒中娱乐中心首页大厅,娱乐中心-大厅welcome熊猫体育【体育中国】直播平台官方网站long8·龙8·(国际版)头号玩家唯一官方网站入口，並在凍存盒外面包裹氣泡墊意昂体育·科技赋能场景,更省心娱乐long8·龙8·(国际版)头号玩家唯一官方网站入口球盟会·qmh(中国区)-官方网站。如使用錫箔紙、自封袋裝載的樣品球盟会·qmh(中国区)-官方网站娱乐中心首页大厅,娱乐中心-大厅welcome，爲防止運輸中受擠壓破損HOME-杏鑫平台-杏鑫娱乐共创美好未来熊猫体育「中国Panda」直播认证官方网站，建議將錫箔紙折疊整齊裝在自封袋中HOME-沐鸣娱乐「强保障平台,更省心注册」，在樣品包裝外再用氣泡墊包好並固定熊猫体育【体育中国】直播平台官方网站球盟会·qmh(中国区)-官方网站。
（4）对于血液样品HOME-杏鑫平台-杏鑫娱乐共创美好未来熊猫体育「中国Panda」直播认证官方网站，建议采用5-10ml 塑料抗凝采血管装载long8·龙8·(国际版)头号玩家唯一官方网站入口HOME-沐鸣娱乐「强保障平台,更省心注册」，为了防止运输过程中采血管因挤压而损坏HOME-沐鸣娱乐「强保障平台,更省心注册」vsport-(中国区)官方网站，需要将每支采血管管身均用气泡垫包好熊猫体育「中国Panda」直播认证官方网站HOME-杏鑫平台-杏鑫娱乐共创美好未来vsport-(中国区)官方网站，然后放置到塑料或纸质包装盒中龙8·long8(国际)唯一官方网站-HOMEvsport-(中国区)官方网站HOME-沐鸣娱乐「强保障平台,更省心注册」。
（5）用乙醇沈澱的樣品由于運輸中會有少量乙醇揮發出long8·龙8·(国际版)头号玩家唯一官方网站入口，建議將樣品管蓋用封口膜纏繞4-5圈熊猫体育【体育中国】直播平台官方网站。
（6）为便于处理和保存意昂体育·科技赋能场景,更省心娱乐HOME-沐鸣娱乐「强保障平台,更省心注册」HOME-杏鑫平台-杏鑫娱乐共创美好未来，组织样品送樣量请不要超过建议送樣量的5倍（特殊的得率较低的样品除外）HOME-沐鸣娱乐「强保障平台,更省心注册」vsport-(中国区)官方网站。
7.2 样本的名称标识
（1）所有的樣品必須具有清晰的標記vsport-(中国区)官方网站娱乐中心首页大厅,娱乐中心-大厅welcome球盟会·qmh(中国区)-官方网站，並且簡潔明了HOME-沐鸣娱乐「强保障平台,更省心注册」HOME-杏鑫平台-杏鑫娱乐共创美好未来long8·龙8·(国际版)头号玩家唯一官方网站入口。
（2）使用錫箔紙包裝的組織樣品建議在錫箔紙內外均標記樣品名稱意昂体育·科技赋能场景,更省心娱乐娱乐中心首页大厅,娱乐中心-大厅welcome熊猫体育【体育中国】直播平台官方网站，並將錫箔紙放在自封袋中龙8·long8(国际)唯一官方网站-HOMEHOME-杏鑫平台-杏鑫娱乐共创美好未来球盟会·qmh(中国区)-官方网站，自封袋外面再標記上樣品名稱意昂体育·科技赋能场景,更省心娱乐，防止錫箔紙上樣品名稱模糊引起樣品混亂意昂体育·科技赋能场景,更省心娱乐。
（3）使用乙醇沈澱的核酸樣品HOME-沐鸣娱乐「强保障平台,更省心注册」，由于揮發出的乙醇會使記號筆的標記模糊龙8·long8(国际)唯一官方网站-HOME，建議用油性記號筆將樣品名稱寫在標簽紙上HOME-沐鸣娱乐「强保障平台,更省心注册」，然後用透明膠帶將標簽紙粘貼在樣品管壁上HOME-杏鑫平台-杏鑫娱乐共创美好未来vsport-(中国区)官方网站，並纏繞2-3圈球盟会·qmh(中国区)-官方网站。
（4）样品名称建议使用“字母+数字”命名方式标注在管盖意昂体育·科技赋能场景,更省心娱乐。其他信息如日期、濃度、物种等可标注在管壁意昂体育·科技赋能场景,更省心娱乐vsport-(中国区)官方网站龙8·long8(国际)唯一官方网站-HOME。所有标注内容需与《样品信息单》保持一致HOME-杏鑫平台-杏鑫娱乐共创美好未来龙8·long8(国际)唯一官方网站-HOME熊猫体育「中国Panda」直播认证官方网站。