環狀RNA（circRNA）是一种新发现的内源性非编码RNA官网- 杏鑫平台 | 帐号ID注册 - 会员登陆中心，具有高稳定性、丰度和保守性等特点EON4凯捷-意昂4凯捷「强保障平台,更省心注册」熊猫体育「ChinaPanda」App下载官方网站必一·运动(B - Sports)体育官方网站，其研究应用方向不仅仅局限于癌症、肿瘤等疾病研究球客岛-专业体育赛事直播资讯平台fun88·(乐天堂)中国区官网_FUN88，也逐渐延伸到生物体的生长发育和代谢调控等领域PG·电子(中国大陆)官方直营网站EON4-意昂4凯捷「强保障平台,更省心注册」必一·运动(B - Sports)体育官方网站。本期circRNA项目文章分享官网- 杏鑫平台 | 帐号ID注册 - 会员登陆中心EON4-意昂4凯捷「强保障平台,更省心注册」EON4凯捷-意昂4凯捷「强保障平台,更省心注册」，是山东大学齐鲁医院神经外科脑科学实验室李刚教授及薛皓教授共同通讯于2022年1月14日在Molecular Cancer（IF=27）发表题为“EWSR1-induced circNEIL3 promotes glioma progression and exosome-mediated macrophage immunosuppressive polarization via stabilizing IGF2BP3[1]”的研究论文熊猫体育「ChinaPanda」App下载官方网站，旨在研究circRNA 在促进胶质瘤发生、恶性进展和巨噬细胞肿瘤促进表袌D�化方面发挥的多方面作用球客岛-专业体育赛事直播资讯平台PG·电子(中国大陆)官方直营网站必一·运动(B - Sports)体育官方网站。諾禾致源提供circRNA建庫測序分析专业服务熊猫体育「ChinaPanda」App下载官方网站。

摘要

胶质瘤是最常见的恶性原发性脑肿瘤EON4-意昂4凯捷「强保障平台,更省心注册」，具有高度免疫抑制的肿瘤微环境（TME）和不良预后熊猫体育【Panda】官方网站- Panda SPORTS熊猫体育「ChinaPanda」App下载官方网站官网- 杏鑫平台 | 帐号ID注册 - 会员登陆中心。環狀RNA（circRNA）是一种新发现的内源性非编码RNA星空·全站体育APP(集团)官方版官网- 杏鑫平台 | 帐号ID注册 - 会员登陆中心，具有高度稳定性、丰度和保守性熊猫体育「ChinaPanda」App下载官方网站，在各种肿瘤的病理生理过程和TME重塑中发挥着重要作用EON4凯捷-意昂4凯捷「强保障平台,更省心注册」。本研究进行circRNA測序分析以探索circRNA在正常和胶质瘤组织中的表达谱熊猫体育【Panda】官方网站- Panda SPORTS必一·运动(B - Sports)体育官方网站EON4凯捷-意昂4凯捷「强保障平台,更省心注册」。一种新的circRNAfun88·(乐天堂)中国区官网_FUN88熊猫体育「ChinaPanda」App下载官方网站，即circNEIL3PG·电子(中国大陆)官方直营网站，在脑胶质瘤发展中的生物学功能已在体外和体内得到证实fun88·(乐天堂)中国区官网_FUN88EON4凯捷-意昂4凯捷「强保障平台,更省心注册」必一·运动(B - Sports)体育官方网站。在机理上星空·全站体育APP(集团)官方版，进行了RNA下拉、质谱、RNA免疫沉淀（RIP）、荧光素酶报告和共免疫沉淀分析EON4凯捷-意昂4凯捷「强保障平台,更省心注册」。最终研究结果表明官网- 杏鑫平台 | 帐号ID注册 - 会员登陆中心，circNEIL3在促进胶质瘤发生、恶性进展和巨噬细胞肿瘤促进表型分化方面发挥着不可忽视的多方面作用EON4-意昂4凯捷「强保障平台,更省心注册」fun88·(乐天堂)中国区官网_FUN88，circNEIL3是胶质瘤的潜在预后生物标志物和治疗靶点熊猫体育「ChinaPanda」App下载官方网站。 

背景

多形性膠質母細胞瘤（GBM）是一種腦膠質瘤fun88·(乐天堂)中国区官网_FUN88球客岛-专业体育赛事直播资讯平台，WHO等級爲IV級星空·全站体育APP(集团)官方版fun88·(乐天堂)中国区官网_FUN88，惡性程度最高[1.2]PG·电子(中国大陆)官方直营网站fun88·(乐天堂)中国区官网_FUN88球客岛-专业体育赛事直播资讯平台。即使主動手術聯合放化療fun88·(乐天堂)中国区官网_FUN88，膠質瘤的治療效果仍然較差PG·电子(中国大陆)官方直营网站官网- 杏鑫平台 | 帐号ID注册 - 会员登陆中心fun88·(乐天堂)中国区官网_FUN88。因此PG·电子(中国大陆)官方直营网站，闡明膠質瘤進展的分子機制以改善患者的預後非常重要必一·运动(B - Sports)体育官方网站fun88·(乐天堂)中国区官网_FUN88。同時膠質瘤相關信號異常的影響不僅限于癌細胞必一·运动(B - Sports)体育官方网站官网- 杏鑫平台 | 帐号ID注册 - 会员登陆中心，而是擴展到與腫瘤微環境（TME）相互作用的複雜網絡官网- 杏鑫平台 | 帐号ID注册 - 会员登陆中心EON4凯捷-意昂4凯捷「强保障平台,更省心注册」。膠質瘤TME的功能和組成受腫瘤細胞內在信號通路和分泌因子的影響PG·电子(中国大陆)官方直营网站。反過來星空·全站体育APP(集团)官方版，TME中的細胞可以通過調節多種腫瘤生物學特性來維持癌症特征球客岛-专业体育赛事直播资讯平台，包括細胞增殖、存活、遷移和免疫逃逸必一·运动(B - Sports)体育官方网站星空·全站体育APP(集团)官方版PG·电子(中国大陆)官方直营网站。越來越多的證據表明fun88·(乐天堂)中国区官网_FUN88，circRNA參與了TME的多方面調節球客岛-专业体育赛事直播资讯平台EON4凯捷-意昂4凯捷「强保障平台,更省心注册」必一·运动(B - Sports)体育官方网站。然而EON4凯捷-意昂4凯捷「强保障平台,更省心注册」熊猫体育【Panda】官方网站- Panda SPORTS，到目前爲止球客岛-专业体育赛事直播资讯平台熊猫体育「ChinaPanda」App下载官方网站，關于circRNA調節膠質瘤中TAM的機制仍不清楚熊猫体育【Panda】官方网站- Panda SPORTS星空·全站体育APP(集团)官方版fun88·(乐天堂)中国区官网_FUN88，了解神經膠質瘤和TAM之間的多方面聯系可以開辟新的治療途徑星空·全站体育APP(集团)官方版官网- 杏鑫平台 | 帐号ID注册 - 会员登陆中心。

材料與方法

實驗材料：39例膠質瘤組織（11例多形性膠質母細胞瘤（GBM）病例和28例低度膠質瘤（LGG）病例）；8例正常腦組織（NBT）；膠質瘤細胞系（A172和U251）

測序方法：circRNA-seq

測序平台：Illumina Novaseq-6000；PE150

實驗方法：qRT-PCR；慢病毒、siRNA、質粒構建簣D毎�轉染；CCK-8；蛋白質印迹檢測；共免疫沈澱；RIP；RNA下拉檢測；免疫熒光；免疫組化等

重要結果

1.腦膠質瘤組織中 circneil3明顯升高

为了确定参与胶质瘤发生和进展的潜在致癌circRNAPG·电子(中国大陆)官方直营网站熊猫体育「ChinaPanda」App下载官方网站，我们使用circRNA測序分析了39例胶质瘤组织和8例正常脑组织中circRNA的表达谱必一·运动(B - Sports)体育官方网站熊猫体育「ChinaPanda」App下载官方网站官网- 杏鑫平台 | 帐号ID注册 - 会员登陆中心。火山圖显示了GBM和LGG之间以及LGG和NBT之间circRNA表达的系统性差异星空·全站体育APP(集团)官方版PG·电子(中国大陆)官方直营网站，进一步分析了胶质瘤组织中差异上调的circRNA星空·全站体育APP(集团)官方版，并确定了hsa_circ_0001460PG·电子(中国大陆)官方直营网站fun88·(乐天堂)中国区官网_FUN88，这是唯一一个随着胶质瘤分级增加而上调的circRNA（圖1C）EON4凯捷-意昂4凯捷「强保障平台,更省心注册」星空·全站体育APP(集团)官方版熊猫体育「ChinaPanda」App下载官方网站。作者将hsa_circ_0001460命名为circNEIL3PG·电子(中国大陆)官方直营网站官网- 杏鑫平台 | 帐号ID注册 - 会员登陆中心熊猫体育【Panda】官方网站- Panda SPORTS，它由NEIL3生成PG·电子(中国大陆)官方直营网站。与NBT相比球客岛-专业体育赛事直播资讯平台，circNEIL3在胶质瘤组织中显著上调fun88·(乐天堂)中国区官网_FUN88EON4-意昂4凯捷「强保障平台,更省心注册」PG·电子(中国大陆)官方直营网站，其表达随着胶质瘤分级的增加而增加（圖1D）PG·电子(中国大陆)官方直营网站官网- 杏鑫平台 | 帐号ID注册 - 会员登陆中心熊猫体育「ChinaPanda」App下载官方网站。ROC曲线表明circNEIL3可以预测胶质瘤患者的不良预后（圖1E）球客岛-专业体育赛事直播资讯平台星空·全站体育APP(集团)官方版。总之官网- 杏鑫平台 | 帐号ID注册 - 会员登陆中心，这些结果表明circNEIL3在胶质瘤组织中显著上调PG·电子(中国大陆)官方直营网站球客岛-专业体育赛事直播资讯平台熊猫体育「ChinaPanda」App下载官方网站，在GBM中表达最高fun88·(乐天堂)中国区官网_FUN88必一·运动(B - Sports)体育官方网站，表明它参与了胶质瘤的肿瘤发生和恶性进展EON4凯捷-意昂4凯捷「强保障平台,更省心注册」PG·电子(中国大陆)官方直营网站球客岛-专业体育赛事直播资讯平台。

圖1

2.circNEIL3在體外和體內促進了膠質瘤的發生

为了研究circNEIL3在胶质瘤进展中的潜在生物学作用必一·运动(B - Sports)体育官方网站，根据轉錄組測序数据EON4-意昂4凯捷「强保障平台,更省心注册」，对与circNEIL3表达显著正相关的基因进行了KEGG富集分析必一·运动(B - Sports)体育官方网站。这些基因在参与肿瘤发病机制的许多途径中显著富集PG·电子(中国大陆)官方直营网站，包括细胞增殖调节途径、与肿瘤侵袭和迁移相关的途径星空·全站体育APP(集团)官方版熊猫体育【Panda】官方网站- Panda SPORTS，以及参与肿瘤发生的经典信号通路熊猫体育「ChinaPanda」App下载官方网站EON4凯捷-意昂4凯捷「强保障平台,更省心注册」球客岛-专业体育赛事直播资讯平台，包括p53信号通路和癌症中的信号通路（圖2A）星空·全站体育APP(集团)官方版EON4-意昂4凯捷「强保障平台,更省心注册」。GSEA分析结果还显示EON4-意昂4凯捷「强保障平台,更省心注册」球客岛-专业体育赛事直播资讯平台EON4凯捷-意昂4凯捷「强保障平台,更省心注册」，这些通路在高circNEIL3表达组中显著富集（圖2B）EON4凯捷-意昂4凯捷「强保障平台,更省心注册」。此外熊猫体育「ChinaPanda」App下载官方网站fun88·(乐天堂)中国区官网_FUN88EON4-意昂4凯捷「强保障平台,更省心注册」，单样本GSEA（ssGSEA）算法结果表明与低表达circNEIL3组相比fun88·(乐天堂)中国区官网_FUN88球客岛-专业体育赛事直播资讯平台，高表达组在致癌信号通路中更明显地富集（圖2C）星空·全站体育APP(集团)官方版必一·运动(B - Sports)体育官方网站。由于circNEIL3可能参与细胞增殖、侵袭和迁移必一·运动(B - Sports)体育官方网站球客岛-专业体育赛事直播资讯平台，作者进一步研究了circNEIL3在细胞行为中的功能PG·电子(中国大陆)官方直营网站球客岛-专业体育赛事直播资讯平台fun88·(乐天堂)中国区官网_FUN88。与生物信息学分析结果一致官网- 杏鑫平台 | 帐号ID注册 - 会员登陆中心球客岛-专业体育赛事直播资讯平台熊猫体育「ChinaPanda」App下载官方网站，证实circNEIL3的下调显著抑制细胞增殖、迁移和侵袭（圖3）熊猫体育「ChinaPanda」App下载官方网站fun88·(乐天堂)中国区官网_FUN88星空·全站体育APP(集团)官方版。综上所述的数据表明circNEIL3在调节肿瘤发生和胶质瘤进展方面具有重要的功能球客岛-专业体育赛事直播资讯平台必一·运动(B - Sports)体育官方网站。

圖2

圖3

3.EWSR1促進腦膠質瘤中circNEIL3的生物發生

circRNA的环化机制受RNA结合蛋白（RBPs）的调节EON4-意昂4凯捷「强保障平台,更省心注册」熊猫体育【Panda】官方网站- Panda SPORTS，RBPs结合到前mRNA的上游和下游区域星空·全站体育APP(集团)官方版。作者使用CircInteractome数据库和starBase 3.0数据库预测了在circNEIL3的上游和下游区域中的三个EWSR1结合位点必一·运动(B - Sports)体育官方网站PG·电子(中国大陆)官方直营网站，称为序列1、序列2和序列3（圖4A）EON4-意昂4凯捷「强保障平台,更省心注册」星空·全站体育APP(集团)官方版。结果发现EON4-意昂4凯捷「强保障平台,更省心注册」星空·全站体育APP(集团)官方版球客岛-专业体育赛事直播资讯平台，EWSR1的表达水平随着胶质瘤的分级而增加官网- 杏鑫平台 | 帐号ID注册 - 会员登陆中心球客岛-专业体育赛事直播资讯平台星空·全站体育APP(集团)官方版，高表达的EWSR1患者的预后比低表达的患者差（圖4B）必一·运动(B - Sports)体育官方网站熊猫体育【Panda】官方网站- Panda SPORTSfun88·(乐天堂)中国区官网_FUN88。此外官网- 杏鑫平台 | 帐号ID注册 - 会员登陆中心EON4凯捷-意昂4凯捷「强保障平台,更省心注册」EON4-意昂4凯捷「强保障平台,更省心注册」，作者还验证了敲除EWSR1可以抑制GBM细胞增殖、侵袭和迁移（圖4C、D）EON4-意昂4凯捷「强保障平台,更省心注册」。同时发现circNEIL3与EWSR1正相关（圖4E）EON4凯捷-意昂4凯捷「强保障平台,更省心注册」熊猫体育「ChinaPanda」App下载官方网站，并且在EWSR敲除的U251和A172细胞中circNEIL3的表达显著降低（圖4F）熊猫体育【Panda】官方网站- Panda SPORTS必一·运动(B - Sports)体育官方网站熊猫体育「ChinaPanda」App下载官方网站。有研究表明星空·全站体育APP(集团)官方版，EWSR1在缺氧环境中可能更活跃EON4凯捷-意昂4凯捷「强保障平台,更省心注册」。因此将U251和A172细胞置于缺氧条件下0 h、 6h、 12h和24 h、 随着暴露时间的增加EON4凯捷-意昂4凯捷「强保障平台,更省心注册」熊猫体育【Panda】官方网站- Panda SPORTS，EWSR1和circNEIL3的表达上调（圖4G、H）fun88·(乐天堂)中国区官网_FUN88球客岛-专业体育赛事直播资讯平台。RIP-qPCR分析证实熊猫体育【Panda】官方网站- Panda SPORTS球客岛-专业体育赛事直播资讯平台，EWSR1可以与NEIL3前体mRNA的序列1和序列3结合fun88·(乐天堂)中国区官网_FUN88星空·全站体育APP(集团)官方版，并且在缺氧条件下结合能力显著上调（圖4I）熊猫体育「ChinaPanda」App下载官方网站。这些数据表明熊猫体育「ChinaPanda」App下载官方网站PG·电子(中国大陆)官方直营网站星空·全站体育APP(集团)官方版，EWSR1可以使circNEIL3循环fun88·(乐天堂)中国区官网_FUN88必一·运动(B - Sports)体育官方网站PG·电子(中国大陆)官方直营网站，并且在缺氧条件下星空·全站体育APP(集团)官方版熊猫体育「ChinaPanda」App下载官方网站，这个过程更加活跃EON4凯捷-意昂4凯捷「强保障平台,更省心注册」星空·全站体育APP(集团)官方版熊猫体育【Panda】官方网站- Panda SPORTS。

圖4

4.CircNEIL3與IGF2BP3發生物理相互作用星空·全站体育APP(集团)官方版fun88·(乐天堂)中国区官网_FUN88熊猫体育【Panda】官方网站- Panda SPORTS，並抑制泛素/蛋白酶體介導的IGF2BP3降解

研究表明EON4-意昂4凯捷「强保障平台,更省心注册」，细胞质保留的圆环RNA通常通过充当RBP的ceRNAs或支架来发挥其功能[5,6]球客岛-专业体育赛事直播资讯平台。为了探索circNEIL3诱导GBM细胞进展的分子机制PG·电子(中国大陆)官方直营网站，首先进行了RNA下拉分析和質譜分析熊猫体育「ChinaPanda」App下载官方网站星空·全站体育APP(集团)官方版官网- 杏鑫平台 | 帐号ID注册 - 会员登陆中心，然后将质谱数据与CircInteractome数据库中预测的RBPs进行交叉发现circNEIL3与IGF2BP3蛋白结合（圖5A）球客岛-专业体育赛事直播资讯平台。接着通过RNA下拉和RIP qPCR分析进一步证实了circNEIL3和IGF2BP3之间的相互作用（圖5B、C）PG·电子(中国大陆)官方直营网站官网- 杏鑫平台 | 帐号ID注册 - 会员登陆中心。最后还进行了RNA-FISH免疫荧光（FISH-IF）分析官网- 杏鑫平台 | 帐号ID注册 - 会员登陆中心fun88·(乐天堂)中国区官网_FUN88PG·电子(中国大陆)官方直营网站，发现circNEIL3在细胞质中与IGF2BP3共定位（圖5D）PG·电子(中国大陆)官方直营网站fun88·(乐天堂)中国区官网_FUN88EON4凯捷-意昂4凯捷「强保障平台,更省心注册」。同时作者发现在TCGA和CGGA数据集中fun88·(乐天堂)中国区官网_FUN88，IGF2BP3的表达水平随着肿瘤分级而增加并且促癌信号通路显著丰富熊猫体育「ChinaPanda」App下载官方网站必一·运动(B - Sports)体育官方网站官网- 杏鑫平台 | 帐号ID注册 - 会员登陆中心。之后实验结果表明circNEIL3并没有显著改变IGF2BP3的mRNA水平球客岛-专业体育赛事直播资讯平台fun88·(乐天堂)中国区官网_FUN88，但显著促进其蛋白表达以及其下游靶点的表达球客岛-专业体育赛事直播资讯平台，参与细胞增殖、侵袭和迁移的生物学功能EON4凯捷-意昂4凯捷「强保障平台,更省心注册」球客岛-专业体育赛事直播资讯平台官网- 杏鑫平台 | 帐号ID注册 - 会员登陆中心。这表明circNEIL3可能通过破坏IGF2BP3蛋白的稳定性来调节胶质瘤的恶性进展EON4-意昂4凯捷「强保障平台,更省心注册」星空·全站体育APP(集团)官方版。最终通过进一步研究以及数据库预测发现PG·电子(中国大陆)官方直营网站，circNEIL3通过抑制泛素/蛋白酶体依赖性降解增强了IGF2BP3蛋白的稳定性球客岛-专业体育赛事直播资讯平台，从而促进了胶质瘤的恶性进展熊猫体育「ChinaPanda」App下载官方网站必一·运动(B - Sports)体育官方网站。

圖5

5.CircNEIL3促進膠質瘤中的巨噬細胞浸潤

最近的证据表明熊猫体育【Panda】官方网站- Panda SPORTS，胶质瘤细胞可以向TME募集免疫细胞球客岛-专业体育赛事直播资讯平台，从而维持胶质瘤病理学并促进恶性进展熊猫体育【Panda】官方网站- Panda SPORTSfun88·(乐天堂)中国区官网_FUN88。为了进一步了解circNEIL3在胶质瘤免疫表型中的确切作用fun88·(乐天堂)中国区官网_FUN88熊猫体育【Panda】官方网站- Panda SPORTS，研究者使用估计算法评估了胶质瘤纯度、基质和免疫评分星空·全站体育APP(集团)官方版，并通过GSVA算法分析了代表不同免疫细胞类型、功能和途径的31个基因集fun88·(乐天堂)中国区官网_FUN88。结果如圖6A熊猫体育【Panda】官方网站- Panda SPORTS星空·全站体育APP(集团)官方版EON4-意昂4凯捷「强保障平台,更省心注册」，与circNEIL3低表达组相比fun88·(乐天堂)中国区官网_FUN88EON4凯捷-意昂4凯捷「强保障平台,更省心注册」PG·电子(中国大陆)官方直营网站，circNEIL3高表达组的TME细胞浸润更大EON4-意昂4凯捷「强保障平台,更省心注册」，免疫和基质评分更高熊猫体育【Panda】官方网站- Panda SPORTS，肿瘤纯度更低EON4凯捷-意昂4凯捷「强保障平台,更省心注册」熊猫体育【Panda】官方网站- Panda SPORTS。与低表达circNEIL3的胶质瘤相比熊猫体育「ChinaPanda」App下载官方网站星空·全站体育APP(集团)官方版熊猫体育【Panda】官方网站- Panda SPORTS，高表达circNEIL3的胶质瘤表现出显著增加的巨噬细胞浸润fun88·(乐天堂)中国区官网_FUN88，这构成了胶质瘤TME中最丰富的细胞群熊猫体育【Panda】官方网站- Panda SPORTS。为了进一步证实circNEIL3在促进巨噬细胞迁移中的作用fun88·(乐天堂)中国区官网_FUN88EON4凯捷-意昂4凯捷「强保障平台,更省心注册」球客岛-专业体育赛事直播资讯平台，使用Transwell分析发现PG·电子(中国大陆)官方直营网站，与NC组相比EON4凯捷-意昂4凯捷「强保障平台,更省心注册」熊猫体育【Panda】官方网站- Panda SPORTS，来自circNEIL3过度表达的GBM细胞的条件培养基（CM）显著促进THP1分化的巨噬细胞迁移（圖6B）熊猫体育「ChinaPanda」App下载官方网站必一·运动(B - Sports)体育官方网站fun88·(乐天堂)中国区官网_FUN88，而来自circNEIL3敲除GBM细胞的CM显示出相反的结果（圖6C）星空·全站体育APP(集团)官方版熊猫体育【Panda】官方网站- Panda SPORTS熊猫体育「ChinaPanda」App下载官方网站。综上所述EON4-意昂4凯捷「强保障平台,更省心注册」熊猫体育【Panda】官方网站- Panda SPORTS，结果表明circNEIL3过表达的肿瘤细胞可以促使巨噬细胞浸润到胶质瘤微环境中EON4-意昂4凯捷「强保障平台,更省心注册」星空·全站体育APP(集团)官方版官网- 杏鑫平台 | 帐号ID注册 - 会员登陆中心。

圖6

6.CircNEIL3可通過hnRNPA2B1包裝成外泌體

过去的研究表明PG·电子(中国大陆)官方直营网站fun88·(乐天堂)中国区官网_FUN88球客岛-专业体育赛事直播资讯平台，circRNA可以被包装成外显体熊猫体育【Panda】官方网站- Panda SPORTS官网- 杏鑫平台 | 帐号ID注册 - 会员登陆中心EON4-意昂4凯捷「强保障平台,更省心注册」，并在肿瘤的进展中发挥重要作用EON4凯捷-意昂4凯捷「强保障平台,更省心注册」官网- 杏鑫平台 | 帐号ID注册 - 会员登陆中心熊猫体育「ChinaPanda」App下载官方网站。首先作者成功地从GBM细胞中分离出外泌体熊猫体育【Panda】官方网站- Panda SPORTSfun88·(乐天堂)中国区官网_FUN88熊猫体育「ChinaPanda」App下载官方网站，接着发现在GBM细胞中circNEIL3的过度表达导致外显体中circNEIL3表达水平的增加EON4凯捷-意昂4凯捷「强保障平台,更省心注册」，而在同一细胞系中circNEIL3的敲除产生相反的结果fun88·(乐天堂)中国区官网_FUN88，这些结果表明circNEIL3可以被包装成外泌体熊猫体育「ChinaPanda」App下载官方网站fun88·(乐天堂)中国区官网_FUN88EON4-意昂4凯捷「强保障平台,更省心注册」。接下来还研究了circNEIL3被包装成外泌体的机制官网- 杏鑫平台 | 帐号ID注册 - 会员登陆中心fun88·(乐天堂)中国区官网_FUN88星空·全站体育APP(集团)官方版。首先通过circNEIL3下拉实验的质谱数据发现circNEIL3可以与hnRNPA2B1结合fun88·(乐天堂)中国区官网_FUN88，hnRNPA2B1可以将各种RNA运输到外泌体EON4-意昂4凯捷「强保障平台,更省心注册」必一·运动(B - Sports)体育官方网站。然后在GBM细胞中通过RIP和RNA下拉分析确认circNEIL3和hnRNPA2B1之间的相互作用（圖7AEON4凯捷-意昂4凯捷「强保障平台,更省心注册」必一·运动(B - Sports)体育官方网站星空·全站体育APP(集团)官方版，B）EON4-意昂4凯捷「强保障平台,更省心注册」。此外球客岛-专业体育赛事直播资讯平台必一·运动(B - Sports)体育官方网站，发现在hnRNPA2B1敲除的GBM细胞中官网- 杏鑫平台 | 帐号ID注册 - 会员登陆中心必一·运动(B - Sports)体育官方网站，circNEIL3表达在细胞中上调球客岛-专业体育赛事直播资讯平台EON4凯捷-意昂4凯捷「强保障平台,更省心注册」熊猫体育「ChinaPanda」App下载官方网站，在外泌体中下调（圖7C）球客岛-专业体育赛事直播资讯平台。总之fun88·(乐天堂)中国区官网_FUN88PG·电子(中国大陆)官方直营网站熊猫体育「ChinaPanda」App下载官方网站，这些结果表明熊猫体育【Panda】官方网站- Panda SPORTS必一·运动(B - Sports)体育官方网站，hnRNPA2B1可以将circNEIL3包装成外质体星空·全站体育APP(集团)官方版。

圖7

7.外泌體將circNEIL3傳遞給TAMs必一·运动(B - Sports)体育官方网站PG·电子(中国大陆)官方直营网站熊猫体育「ChinaPanda」App下载官方网站，從而使它們能夠通過穩定IGF2BP3獲得免疫抑制特性

外泌體在癌細胞和TAM之間的通訊中起著至關重要的作用EON4-意昂4凯捷「强保障平台,更省心注册」，我們從正常表達、過度表達或敲除circNEIL3的GBM細胞中收集外泌體必一·运动(B - Sports)体育官方网站熊猫体育【Panda】官方网站- Panda SPORTS，並將其分爲高、中、低表達組fun88·(乐天堂)中国区官网_FUN88EON4-意昂4凯捷「强保障平台,更省心注册」球客岛-专业体育赛事直播资讯平台，然後使用它們治療THP1分化的巨噬細胞EON4凯捷-意昂4凯捷「强保障平台,更省心注册」fun88·(乐天堂)中国区官网_FUN88，結果表明外泌體可以將circNEIL3傳遞給TAM星空·全站体育APP(集团)官方版熊猫体育【Panda】官方网站- Panda SPORTS熊猫体育「ChinaPanda」App下载官方网站，從而使它們獲得血管生成和免疫抑制特性PG·电子(中国大陆)官方直营网站熊猫体育【Panda】官方网站- Panda SPORTS。爲了進一步驗證circNEIL3對體內巨噬細胞免疫抑制極化的影響PG·电子(中国大陆)官方直营网站必一·运动(B - Sports)体育官方网站熊猫体育【Panda】官方网站- Panda SPORTS，將過度表達circNEIL3或陰性對照載體的巨噬細胞與膠質瘤細胞原位共植入裸鼠腦內EON4-意昂4凯捷「强保障平台,更省心注册」必一·运动(B - Sports)体育官方网站球客岛-专业体育赛事直播资讯平台，結果表明IGF2BP3可以作爲巨噬細胞中circNEIL3的下遊效應器fun88·(乐天堂)中国区官网_FUN88官网- 杏鑫平台 | 帐号ID注册 - 会员登陆中心球客岛-专业体育赛事直播资讯平台，使其獲得免疫抑制特性EON4-意昂4凯捷「强保障平台,更省心注册」必一·运动(B - Sports)体育官方网站，進而促進膠質瘤的進展球客岛-专业体育赛事直播资讯平台。

結論

总之球客岛-专业体育赛事直播资讯平台EON4-意昂4凯捷「强保障平台,更省心注册」，本研究发现了一种新的環狀RNA熊猫体育「ChinaPanda」App下载官方网站PG·电子(中国大陆)官方直营网站，circNEIL3必一·运动(B - Sports)体育官方网站，它在人脑胶质瘤组织中上调EON4-意昂4凯捷「强保障平台,更省心注册」。受EWSR1调控的circNEIL3的表达随着胶质瘤分级的增加而增加星空·全站体育APP(集团)官方版EON4-意昂4凯捷「强保障平台,更省心注册」球客岛-专业体育赛事直播资讯平台。在功能上fun88·(乐天堂)中国区官网_FUN88官网- 杏鑫平台 | 帐号ID注册 - 会员登陆中心，作者证实circNEIL3在体外和体内促进了肿瘤的发生和胶质瘤的进展必一·运动(B - Sports)体育官方网站星空·全站体育APP(集团)官方版fun88·(乐天堂)中国区官网_FUN88。在机制上EON4-意昂4凯捷「强保障平台,更省心注册」，circNEIL3通过阻止Hect4介导的泛素化来稳定已知致癌蛋白IGF2BP3官网- 杏鑫平台 | 帐号ID注册 - 会员登陆中心熊猫体育【Panda】官方网站- Panda SPORTS。此外官网- 杏鑫平台 | 帐号ID注册 - 会员登陆中心，circNEIL3过度表达的胶质瘤细胞可促使巨噬细胞浸润TME球客岛-专业体育赛事直播资讯平台熊猫体育【Panda】官方网站- Panda SPORTS。最后官网- 杏鑫平台 | 帐号ID注册 - 会员登陆中心必一·运动(B - Sports)体育官方网站熊猫体育「ChinaPanda」App下载官方网站，circNEIL3可以被hnRNPA2B1包装成外质体PG·电子(中国大陆)官方直营网站，并传递给浸润性TAM必一·运动(B - Sports)体育官方网站官网- 杏鑫平台 | 帐号ID注册 - 会员登陆中心，从而使它们能够通过稳定IGF2BP3获得免疫抑制特性必一·运动(B - Sports)体育官方网站，进而促进胶质瘤生成和恶性进展EON4凯捷-意昂4凯捷「强保障平台,更省心注册」fun88·(乐天堂)中国区官网_FUN88。研究结果表明熊猫体育「ChinaPanda」App下载官方网站，circNEIL3可能是一种新的预后生物标志物PG·电子(中国大陆)官方直营网站EON4凯捷-意昂4凯捷「强保障平台,更省心注册」，并有望成为胶质瘤的治疗靶点必一·运动(B - Sports)体育官方网站EON4凯捷-意昂4凯捷「强保障平台,更省心注册」。  

思路總結

參考文獻

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