在已知的黑色素瘤致病基因中球友会-qy球友会-（中国）千亿球友会熊猫体育中国app官网下载地址（官方）认证体育赛事直播平台PA视讯·(中国区)官方网站 - Play，BRAF是最常見的突變驅動基因九游·会-(官网)真人游戏第一品牌kg体育官网视讯(中文站) - 官方网站，它通過持續激活MAPK通路PA视讯·(中国区)官方网站 - Play熊猫体育中国app官网下载地址（官方）认证体育赛事直播平台球友会QY(千亿中国)有限公司-会员入口，使腫瘤細胞具備更強的侵襲能力K8·凯发(中国【官网】集团天生赢家一触即发。具有這類突變的患者極易産生耐藥性杏宇平台|杏宇娱乐|杏宇引领传媒未来球客岛_球客直播_足球直播_体育直播_nba直播_球客岛，即使采用BRAF/MEK抑制劑聯合方案杏宇平台|杏宇娱乐|杏宇引领传媒未来K8·凯发(中国【官网】集团天生赢家一触即发，仍有70%患者會在兩年內出現疾病惡化九游·会-(官网)真人游戏第一品牌CQ9电子·(china)唯一官方网站。因此急需超越MAPK通路的新策略來克服耐藥球友会QY(千亿中国)有限公司-会员入口。近年研究發現球友会QY(千亿中国)有限公司-会员入口球客岛_球客直播_足球直播_体育直播_nba直播_球客岛，耐藥性與線粒體功能增強（如氧化磷酸化）有關K8·凯发(中国【官网】集团天生赢家一触即发，提示靶向線粒體是克服耐藥的新策略球友会-qy球友会-（中国）千亿球友会熊猫体育中国app官网下载地址（官方）认证体育赛事直播平台，且銅離子對線粒體功能至關重要熊猫体育中国app官网下载地址（官方）认证体育赛事直播平台CQ9电子·(china)唯一官方网站球客岛_球客直播_足球直播_体育直播_nba直播_球客岛。老藥雙硫侖（Disulfiram九游·会-(官网)真人游戏第一品牌球友会QY(千亿中国)有限公司-会员入口，DSF）是一種銅離子載體K8·凯发(中国【官网】集团天生赢家一触即发PA视讯·(中国区)官方网站 - Play，能在細胞內絡合銅離子並促進其積累九游·会-(官网)真人游戏第一品牌球客岛_球客直播_足球直播_体育直播_nba直播_球客岛，已在多種癌症中顯示出抗癌潛力PA视讯·(中国区)官方网站 - Play球友会-qy球友会-（中国）千亿球友会杏宇平台|杏宇娱乐|杏宇引领传媒未来。那麽K8·凯发(中国【官网】集团天生赢家一触即发九游·会-(官网)真人游戏第一品牌，DSF能否通過銅依賴性方式誘導線粒體功能障礙杏宇平台|杏宇娱乐|杏宇引领传媒未来球友会-qy球友会-（中国）千亿球友会，從而逆轉黑色素瘤耐藥呢CQ9电子·(china)唯一官方网站？

2025年6月球友会-qy球友会-（中国）千亿球友会kg体育官网视讯(中文站) - 官方网站，来自南方医科大學皮肤病医院的朱冠男老师團隊在顶级期刊Cell Death & Disease（IF=9.6）发表题为“Exploiting mitochondrial dysfunction to overcome BRAF inhibitor resistance in advanced melanoma: the role of disulfiram as a copper ionophore“的研究成果杏宇平台|杏宇娱乐|杏宇引领传媒未来CQ9电子·(china)唯一官方网站K8·凯发(中国【官网】集团天生赢家一触即发，该成果分析揭示DSF通過誘導線粒體氧化損傷克服耐藥性的全新機制——TXNIP與TRX2互作球客岛_球客直播_足球直播_体育直播_nba直播_球客岛熊猫体育中国app官网下载地址（官方）认证体育赛事直播平台CQ9电子·(china)唯一官方网站。DSF與BRAF抑制剂（BRAFi）联用是一种极具潜力的联合疗法kg体育官网视讯(中文站) - 官方网站熊猫体育中国app官网下载地址（官方）认证体育赛事直播平台，有望快速进入临床研究球友会QY(千亿中国)有限公司-会员入口熊猫体育中国app官网下载地址（官方）认证体育赛事直播平台，改善晚期黑色素瘤患者的预后kg体育官网视讯(中文站) - 官方网站。文章中所用蛋白質組學服務由諾禾致源提供球友会-qy球友会-（中国）千亿球友会K8·凯发(中国【官网】集团天生赢家一触即发。

研究思路

1. 創新视角PA视讯·(中国区)官方网站 - Play球友会QY(千亿中国)有限公司-会员入口杏宇平台|杏宇娱乐|杏宇引领传媒未来，跳出传统的MAPK通路再激活框架K8·凯发(中国【官网】集团天生赢家一触即发PA视讯·(中国区)官方网站 - Play，将目光投向肿瘤細胞的代谢弱点——線粒體：利用已上市藥物雙硫侖（Disulfiram, DSF）的銅離子载體特性CQ9电子·(china)唯一官方网站K8·凯发(中国【官网】集团天生赢家一触即发PA视讯·(中国区)官方网站 - Play，促使銅離子在細胞内蓄积球友会-qy球友会-（中国）千亿球友会CQ9电子·(china)唯一官方网站杏宇平台|杏宇娱乐|杏宇引领传媒未来，进而特异性破坏BRAF抑制剂（BRAFi）耐藥黑色素瘤細胞的線粒體功能球友会-qy球友会-（中国）千亿球友会CQ9电子·(china)唯一官方网站九游·会-(官网)真人游戏第一品牌，最终逆转其耐藥状态球友会QY(千亿中国)有限公司-会员入口球客岛_球客直播_足球直播_体育直播_nba直播_球客岛kg体育官网视讯(中文站) - 官方网站。

2. 转录組學的发现與蛋白質組學的互作验证强强联合PA视讯·(中国区)官方网站 - Play熊猫体育中国app官网下载地址（官方）认证体育赛事直播平台CQ9电子·(china)唯一官方网站，構建完整的证据链：转录組锁定潜在关键基因TXNIP（Thioredoxin-interacting protein）球客岛_球客直播_足球直播_体育直播_nba直播_球客岛熊猫体育中国app官网下载地址（官方）认证体育赛事直播平台球友会-qy球友会-（中国）千亿球友会，蛋白質組无偏、全面分析并筛选出TXNIP互作蛋白硫氧还蛋白2（Thioredoxin 2PA视讯·(中国区)官方网站 - Play，TRX2）CQ9电子·(china)唯一官方网站球客岛_球客直播_足球直播_体育直播_nba直播_球客岛。多組學聯合分析DSF與BRAFi联合作用核心——TXNIP與TRX2相互作用球客岛_球客直播_足球直播_体育直播_nba直播_球客岛CQ9电子·(china)唯一官方网站。

3. 體外/體内模型功能验证PA视讯·(中国区)官方网站 - Play球友会-qy球友会-（中国）千亿球友会，证实DSF作用原理與潜在治疗价值：DSF與BRAFi联用是一种极具潜力的、可快速进入临床研究的老藥新用策略K8·凯发(中国【官网】集团天生赢家一触即发球友会-qy球友会-（中国）千亿球友会kg体育官网视讯(中文站) - 官方网站，用于治疗耐藥性晚期黑色素瘤PA视讯·(中国区)官方网站 - Play球友会QY(千亿中国)有限公司-会员入口，且藥效依賴于TXNIP-TRX2熊猫体育中国app官网下载地址（官方）认证体育赛事直播平台。文章中所用蛋白質組學服務由諾禾致源提供球友会QY(千亿中国)有限公司-会员入口熊猫体育中国app官网下载地址（官方）认证体育赛事直播平台。

研究流程圖

關鍵結果

1.DSF通過銅依賴途徑協同BRAFi殺傷耐藥黑色素瘤細胞

圖1 DSF以銅依賴的方式抑制BRAFi耐藥黑色素瘤的生长

(A) Vem和DSF单藥及联用（48小时）对BRAFi耐藥黑色素瘤細胞活力的影响（CCK-8法）；(B) Vem单独治疗、DSF单独治疗或Vem+DSF联合治疗的小鼠肿瘤的圖像kg体育官网视讯(中文站) - 官方网站杏宇平台|杏宇娱乐|杏宇引领传媒未来球客岛_球客直播_足球直播_体育直播_nba直播_球客岛，肿瘤體积和重量；(C) 20μM TTM预处理对Vem+DSF联合藥效的影响（CCK-8评估細胞活力）；(D) 20μM TTM预处理对Vem+DSF联合疗法抗肿瘤效果的影响九游·会-(官网)真人游戏第一品牌，肿瘤代表性圖片、肿瘤體积及重量

通過體外細胞实验表明BRAF抑制剂BRAFi（VemurafenibPA视讯·(中国区)官方网站 - Play，Vem）與DSF联合用藥可显著降低耐藥黑色素瘤細胞系（451Lu-R和UACC62-R）的存活率K8·凯发(中国【官网】集团天生赢家一触即发九游·会-(官网)真人游戏第一品牌球客岛_球客直播_足球直播_体育直播_nba直播_球客岛，且对肿瘤生长抑制的效果显著由于单独使用Vem或DSF（圖1A）K8·凯发(中国【官网】集团天生赢家一触即发kg体育官网视讯(中文站) - 官方网站球友会-qy球友会-（中国）千亿球友会。同时杏宇平台|杏宇娱乐|杏宇引领传媒未来，动物模型实验結果也表明Vem+DSF联用K8·凯发(中国【官网】集团天生赢家一触即发，在體内也能显著抑制耐藥肿瘤的生长K8·凯发(中国【官网】集团天生赢家一触即发九游·会-(官网)真人游戏第一品牌，进一步验证體外的協同效應（圖1B）球友会-qy球友会-（中国）千亿球友会九游·会-(官网)真人游戏第一品牌CQ9电子·(china)唯一官方网站。

爲了進一步探究Vem+DSF联用调控細胞死亡的形式kg体育官网视讯(中文站) - 官方网站，研究人员使用了多种抑制剂对細胞进行预处理CQ9电子·(china)唯一官方网站熊猫体育中国app官网下载地址（官方）认证体育赛事直播平台。結果表明CQ9电子·(china)唯一官方网站，銅螯合剂TTM预处理細胞完全逆转了Vem+DSF的“殺傷”效果球友会-qy球友会-（中国）千亿球友会K8·凯发(中国【官网】集团天生赢家一触即发杏宇平台|杏宇娱乐|杏宇引领传媒未来，耐藥黑色素瘤細胞存活率恢复到接近对照組水平（圖1C）CQ9电子·(china)唯一官方网站kg体育官网视讯(中文站) - 官方网站杏宇平台|杏宇娱乐|杏宇引领传媒未来。随后的體内实验再次证实球客岛_球客直播_足球直播_体育直播_nba直播_球客岛，DSF的增效作用依賴于銅離子CQ9电子·(china)唯一官方网站球友会QY(千亿中国)有限公司-会员入口，“剥夺”銅離子可以逆转DSF的疗效（圖1D）球友会QY(千亿中国)有限公司-会员入口K8·凯发(中国【官网】集团天生赢家一触即发。

2.DSF誘導黑色素瘤細胞線粒體結構與功能的障礙

圖2 DSF通過誘導線粒體功能障礙来逆转对黑色素瘤細胞对BRAFi的抵抗作用

(A) RNA-seq基因富集分析（Vem单独处理kg体育官网视讯(中文站) - 官方网站，Vem+DSF联合处理）；(B) Vem单独处理或Vem+DSF联合处理線粒體形态圖（BRAFi細胞系：451Lu-R和UACC62-R）；(C) JC-1染色法测定Vem单独处理或Vem+DSF联合处理（BRAFi細胞系：451Lu-R和UACC62-R）線粒體膜电位；(D) Vem单独处理或Vem+DSF联合处理（BRAFi細胞系：451Lu-R和UACC62-R）ATP含量；(E) Seahorse分析Vem单独处理或Vem+DSF联合处理（BRAFi細胞系：451Lu-R和UACC62-R）細胞的耗氧率（OCR）

爲深入探究Vem與DSF联合誘導耐藥黑色素瘤細胞死亡的機制球友会-qy球友会-（中国）千亿球友会，我们对经Vem单藥及Vem與DSF联合处理的BRAFi耐藥細胞进行了轉錄組測序球客岛_球客直播_足球直播_体育直播_nba直播_球客岛，并比较其转录谱差异九游·会-(官网)真人游戏第一品牌。GO分析显示球友会-qy球友会-（中国）千亿球友会熊猫体育中国app官网下载地址（官方）认证体育赛事直播平台球客岛_球客直播_足球直播_体育直播_nba直播_球客岛，差异表达基因显著富集于線粒體結構與功能相关通路（圖2A）球友会-qy球友会-（中国）千亿球友会。透射电镜結果（圖2B）及JC-1染色結果（圖2C）进一步表明球客岛_球客直播_足球直播_体育直播_nba直播_球客岛PA视讯·(中国区)官方网站 - Play，DSF可显著破坏線粒體超微結構并降低線粒體膜电位熊猫体育中国app官网下载地址（官方）认证体育赛事直播平台球客岛_球客直播_足球直播_体育直播_nba直播_球客岛PA视讯·(中国区)官方网站 - Play。此外PA视讯·(中国区)官方网站 - Playkg体育官网视讯(中文站) - 官方网站杏宇平台|杏宇娱乐|杏宇引领传媒未来，ATP含量检测（圖2D）及Seahorse線粒體呼吸测定結果（圖2E）一致显示CQ9电子·(china)唯一官方网站，DSF处理能明显損害線粒體功能球友会-qy球友会-（中国）千亿球友会球友会QY(千亿中国)有限公司-会员入口九游·会-(官网)真人游戏第一品牌，尤其表现为線粒體耗氧率（Oxygen consumption rate球友会QY(千亿中国)有限公司-会员入口，OCR）的下降球友会QY(千亿中国)有限公司-会员入口，提示DSF特异性抑制氧化磷酸化過程PA视讯·(中国区)官方网站 - Play球友会QY(千亿中国)有限公司-会员入口kg体育官网视讯(中文站) - 官方网站。

綜上所述K8·凯发(中国【官网】集团天生赢家一触即发PA视讯·(中国区)官方网站 - PlayCQ9电子·(china)唯一官方网站，DSF逆转BRAFi耐藥的核心機制可能與其誘導線粒體結構與功能严重損傷密切相关杏宇平台|杏宇娱乐|杏宇引领传媒未来，尤其是通過特异性抑制氧化磷酸化熊猫体育中国app官网下载地址（官方）认证体育赛事直播平台杏宇平台|杏宇娱乐|杏宇引领传媒未来，从而阻断了耐藥細胞的能量代谢供應球客岛_球客直播_足球直播_体育直播_nba直播_球客岛球友会-qy球友会-（中国）千亿球友会。

3.線粒體功能障礙由氧化應激介導

圖3 DSF引起的線粒體功能障礙依賴于氧化應激的加剧

(A) 检测BRAFi耐藥細胞经Vem或Vem+DSF处理后線粒體活性氧（mt-ROS）水平球友会QY(千亿中国)有限公司-会员入口九游·会-(官网)真人游戏第一品牌。（左：流式細胞术球友会-qy球友会-（中国）千亿球友会，右：免疫荧光染色）； (B) Mito-TEMPO预处理BRAFi細胞后球友会-qy球友会-（中国）千亿球友会CQ9电子·(china)唯一官方网站，Vem或Vem+DSF对細胞活力的水平（左：CCK-8九游·会-(官网)真人游戏第一品牌，右：克隆形成）；(C) Mito-TEMPO预处理BRAFi細胞后PA视讯·(中国区)官方网站 - Play球客岛_球客直播_足球直播_体育直播_nba直播_球客岛熊猫体育中国app官网下载地址（官方）认证体育赛事直播平台，Vem或Vem+DSF对線粒體形态的影响；(D) Mito-TEMPO预处理BRAFi細胞后杏宇平台|杏宇娱乐|杏宇引领传媒未来，Vem或Vem+DSF对線粒體膜电位（MMP荧光染色）的影响；(E) Mito-TEMPO预处理BRAFi細胞后PA视讯·(中国区)官方网站 - Play，Vem或Vem+DSF对ATP水平的影响；(F) Seahorse分析Mito-TEMPO预处理BRAFi細胞后K8·凯发(中国【官网】集团天生赢家一触即发九游·会-(官网)真人游戏第一品牌，Vem或Vem+DSF对細胞的耗氧率（OCR）的影响

近期研究表明球客岛_球客直播_足球直播_体育直播_nba直播_球客岛杏宇平台|杏宇娱乐|杏宇引领传媒未来PA视讯·(中国区)官方网站 - Play，細胞内銅浓度上升会加剧活性氧的生成熊猫体育中国app官网下载地址（官方）认证体育赛事直播平台球友会QY(千亿中国)有限公司-会员入口K8·凯发(中国【官网】集团天生赢家一触即发，从而導致線粒體功能紊乱kg体育官网视讯(中文站) - 官方网站。那么球友会QY(千亿中国)有限公司-会员入口，当使用DSF处理耐藥細胞时球友会QY(千亿中国)有限公司-会员入口，氧化應激是否在其中发挥作用球友会QY(千亿中国)有限公司-会员入口？

實驗發現球客岛_球客直播_足球直播_体育直播_nba直播_球客岛，DSF处理促使耐藥細胞線粒體内的活性氧（mt-ROS）水平显著上升（圖3A）球友会-qy球友会-（中国）千亿球友会球客岛_球客直播_足球直播_体育直播_nba直播_球客岛。为进一步验证氧化應激的作用球友会-qy球友会-（中国）千亿球友会，研究者使用Mito-TEMPO——一种能够特异性清除線粒體内超氧化物的抗氧化剂PA视讯·(中国区)官方网站 - PlayK8·凯发(中国【官网】集团天生赢家一触即发杏宇平台|杏宇娱乐|杏宇引领传媒未来，对細胞进行处理九游·会-(官网)真人游戏第一品牌球友会QY(千亿中国)有限公司-会员入口。

結果显示kg体育官网视讯(中文站) - 官方网站球客岛_球客直播_足球直播_体育直播_nba直播_球客岛，Mito-TEMPO有效清除了mt-ROS（圖3B-F）杏宇平台|杏宇娱乐|杏宇引领传媒未来九游·会-(官网)真人游戏第一品牌。在后续功能实验中杏宇平台|杏宇娱乐|杏宇引领传媒未来九游·会-(官网)真人游戏第一品牌PA视讯·(中国区)官方网站 - Play，CCK-8與克隆形成试验一致表明：清除mt-ROS明显缓解了“Vem+DSF”对細胞生长的抑制（圖3B）熊猫体育中国app官网下载地址（官方）认证体育赛事直播平台。透射电镜观察（圖3C）、線粒體膜电位测定（圖3D）、Seahorse能量代谢分析（圖3E）及ATP含量（圖3F）检测也进一步证实熊猫体育中国app官网下载地址（官方）认证体育赛事直播平台九游·会-(官网)真人游戏第一品牌PA视讯·(中国区)官方网站 - Play，Mito-TEMPO预处理可显著恢复由DSF引发的線粒體功能損傷球友会-qy球友会-（中国）千亿球友会球客岛_球客直播_足球直播_体育直播_nba直播_球客岛。

綜上杏宇平台|杏宇娱乐|杏宇引领传媒未来PA视讯·(中国区)官方网站 - Play，這些數據說明熊猫体育中国app官网下载地址（官方）认证体育赛事直播平台球客岛_球客直播_足球直播_体育直播_nba直播_球客岛kg体育官网视讯(中文站) - 官方网站，DSF主要通過誘发氧化應激、破坏線粒體功能球友会QY(千亿中国)有限公司-会员入口球友会-qy球友会-（中国）千亿球友会PA视讯·(中国区)官方网站 - Play，进而抑制耐藥黑色素瘤細胞的生长球友会QY(千亿中国)有限公司-会员入口九游·会-(官网)真人游戏第一品牌。

4.銅離子是氧化損傷的“始作俑者”

圖4 清除銅離子可逆转DSF誘发的線粒體氧化損傷

(A) 采用流式細胞术(左)和免疫荧光染色（右）检测BRAFi細胞在经20μM TTM预处理（或不预处理）CQ9电子·(china)唯一官方网站杏宇平台|杏宇娱乐|杏宇引领传媒未来，随后经Vem或Vem+DSF处理后的線粒體活性氧（mt-ROS）水平； (B) 透射电镜观测BRAFi細胞在经20μM TTM预处理（或不预处理）PA视讯·(中国区)官方网站 - Play，随后经Vem或Vem+DSF处理后的線粒體形态；(C)免疫荧光染色检测BRAFi細胞在经20μM TTM预处理（或不预处理）熊猫体育中国app官网下载地址（官方）认证体育赛事直播平台，随后经Vem或Vem+DSF处理后的線粒體膜电位（MMP）水平； (D) 经Seahorse分析BRAFi細胞在TTM预处理（或不预处理）杏宇平台|杏宇娱乐|杏宇引领传媒未来球友会QY(千亿中国)有限公司-会员入口熊猫体育中国app官网下载地址（官方）认证体育赛事直播平台，随后经Vem或Vem+DSF处理后線粒體的呼吸功能；(E) BRAFi細胞在TTM预处理（或不预处理）PA视讯·(中国区)官方网站 - Play，随后经Vem或Vem+DSF处理后的ATP水平；(F) BRAFi細胞在TTM预处理（或不预处理）K8·凯发(中国【官网】集团天生赢家一触即发杏宇平台|杏宇娱乐|杏宇引领传媒未来kg体育官网视讯(中文站) - 官方网站，随后经Vem或Vem+DSF处理后細胞的活力；(G) 采用CCK-8法检测FDX1敲低的BRAFi細胞在Vem或Vem+DSF处理下的細胞活力；(H) 采用CCK-8法检测FDX1過表达的BRAFi細胞在Vem或Vem+DSF处理下的細胞活力

既往研究表明熊猫体育中国app官网下载地址（官方）认证体育赛事直播平台杏宇平台|杏宇娱乐|杏宇引领传媒未来，DSF可介導銅離子内流熊猫体育中国app官网下载地址（官方）认证体育赛事直播平台球客岛_球客直播_足球直播_体育直播_nba直播_球客岛九游·会-(官网)真人游戏第一品牌。为探究銅離子在DSF誘導的線粒體氧化損傷中的作用杏宇平台|杏宇娱乐|杏宇引领传媒未来熊猫体育中国app官网下载地址（官方）认证体育赛事直播平台球友会QY(千亿中国)有限公司-会员入口，本研究采用TTM预处理去除培养體系中的銅離子球客岛_球客直播_足球直播_体育直播_nba直播_球客岛杏宇平台|杏宇娱乐|杏宇引领传媒未来，并系统评估其对線粒體結構與功能的影响K8·凯发(中国【官网】集团天生赢家一触即发CQ9电子·(china)唯一官方网站熊猫体育中国app官网下载地址（官方）认证体育赛事直播平台。流式細胞术與共聚焦显微镜結果显示（圖4A）PA视讯·(中国区)官方网站 - Play，TTM处理显著降低了DSF在BRAFi耐藥黑色素瘤細胞中引发的線粒體氧化應激水平杏宇平台|杏宇娱乐|杏宇引领传媒未来球客岛_球客直播_足球直播_体育直播_nba直播_球客岛熊猫体育中国app官网下载地址（官方）认证体育赛事直播平台。透射电镜圖进一步显示杏宇平台|杏宇娱乐|杏宇引领传媒未来kg体育官网视讯(中文站) - 官方网站熊猫体育中国app官网下载地址（官方）认证体育赛事直播平台，TTM预处理可维持Vem+DSF处理組中線粒體的正常形态K8·凯发(中国【官网】集团天生赢家一触即发熊猫体育中国app官网下载地址（官方）认证体育赛事直播平台球友会QY(千亿中国)有限公司-会员入口，经联合处理的BRAFi細胞未出现肿胀、空泡化及嵴結構丢失等病理改变（圖4B）熊猫体育中国app官网下载地址（官方）认证体育赛事直播平台球友会QY(千亿中国)有限公司-会员入口K8·凯发(中国【官网】集团天生赢家一触即发。JC-1染色結果表明球客岛_球客直播_足球直播_体育直播_nba直播_球客岛球友会-qy球友会-（中国）千亿球友会，TTM预处理有效阻止了Vem+DSF所引起的線粒體膜电位崩溃（圖4C）K8·凯发(中国【官网】集团天生赢家一触即发熊猫体育中国app官网下载地址（官方）认证体育赛事直播平台球友会-qy球友会-（中国）千亿球友会，并缓解氧化呼吸功能損傷（圖4D和E）九游·会-(官网)真人游戏第一品牌。克隆形成实验也证实球友会-qy球友会-（中国）千亿球友会杏宇平台|杏宇娱乐|杏宇引领传媒未来球客岛_球客直播_足球直播_体育直播_nba直播_球客岛，TTM可逆转Vem+DSF对BRAFi耐藥細胞生长的抑制（圖4F）球客岛_球客直播_足球直播_体育直播_nba直播_球客岛PA视讯·(中国区)官方网站 - Play。上述結果表明kg体育官网视讯(中文站) - 官方网站，清除銅離子可逆转DSF所誘发的線粒體氧化應激球友会-qy球友会-（中国）千亿球友会kg体育官网视讯(中文站) - 官方网站球客岛_球客直播_足球直播_体育直播_nba直播_球客岛，从而恢复其結構與功能杏宇平台|杏宇娱乐|杏宇引领传媒未来球友会QY(千亿中国)有限公司-会员入口PA视讯·(中国区)官方网站 - Play。

基于FDX1在銅死亡通路中的关键作用PA视讯·(中国区)官方网站 - Play球友会QY(千亿中国)有限公司-会员入口，我们在耐藥細胞中对FDX1进行表达调控CQ9电子·(china)唯一官方网站kg体育官网视讯(中文站) - 官方网站。值得注意的是熊猫体育中国app官网下载地址（官方）认证体育赛事直播平台CQ9电子·(china)唯一官方网站，敲低FDX1并未减弱Vem+DSF的協同抑制作用（圖4G）kg体育官网视讯(中文站) - 官方网站PA视讯·(中国区)官方网站 - Play杏宇平台|杏宇娱乐|杏宇引领传媒未来，而過表达FDX1也未进一步增强该联合处理的疗效（圖4H）K8·凯发(中国【官网】集团天生赢家一触即发，提示Vem+DSF的抗肿瘤效應可能独立于经典的FDX1介導的銅死亡通路杏宇平台|杏宇娱乐|杏宇引领传媒未来球友会-qy球友会-（中国）千亿球友会PA视讯·(中国区)官方网站 - Play。

5.TXNIP-TRX2互作是介導氧化損傷的核心分子機制

圖5 TXNIP通過TRX2結合进而影响線粒體活性氧mt-ROS的积累簣D毎�死亡

(A) 通過转录組分析Vem单独处理或Vem+DSF联合处理的BRAFi細胞的差异基因；(B) 通過WB分析Vem单独处理或Vem+DSF联合处理的BRAFi細胞中TXNIP的表达情况；(C) 在对裸鼠进行为期14天的 Vem+DSF或Vem治疗后球友会-qy球友会-（中国）千亿球友会PA视讯·(中国区)官方网站 - Play，接种对照細胞（451Lu-R ko-NC）或TXNIP敲除細胞（451Lu-R ko-TXNIP）的裸鼠體内剥離的肿瘤实物圖、肿瘤體积和肿瘤重量；(D) 通過STRING数据库構建TXNIP互作网络；(E) 互作蛋白表达差异火山圖；(F) 采用流式細胞术检测BRAFi細胞在经TXNIP-in-1预处理（或不预处理）杏宇平台|杏宇娱乐|杏宇引领传媒未来熊猫体育中国app官网下载地址（官方）认证体育赛事直播平台kg体育官网视讯(中文站) - 官方网站，随后经Vem或Vem+DSF处理后的線粒體活性氧（mt-ROS）水平；(G) 采用CCK-8法检测TRX2敲低的BRAFi細胞在不同处理条件下的細胞活力

爲深入探究DSF與Vem联合治疗的分子機制K8·凯发(中国【官网】集团天生赢家一触即发PA视讯·(中国区)官方网站 - Play，研究人员对Vem单藥及Vem+DSF联合处理的細胞进行了轉錄組測序分析九游·会-(官网)真人游戏第一品牌球友会QY(千亿中国)有限公司-会员入口球友会-qy球友会-（中国）千亿球友会。結果显示K8·凯发(中国【官网】集团天生赢家一触即发CQ9电子·(china)唯一官方网站九游·会-(官网)真人游戏第一品牌，TXNIP（Thioredoxin Interacting Protein）是表达上调最显著的基因之一九游·会-(官网)真人游戏第一品牌，且其表达與DSF处理高度相关CQ9电子·(china)唯一官方网站，因此被确定为后续研究的焦点（圖5A）PA视讯·(中国区)官方网站 - Play杏宇平台|杏宇娱乐|杏宇引领传媒未来。Western blotting結果进一步证实九游·会-(官网)真人游戏第一品牌杏宇平台|杏宇娱乐|杏宇引领传媒未来球友会QY(千亿中国)有限公司-会员入口，Vem+DSF組細胞中TXNIP蛋白水平显著高于Vem单藥組K8·凯发(中国【官网】集团天生赢家一触即发PA视讯·(中国区)官方网站 - Play，而该上调效應繗⒒銅螯合剂TTM完全阻断（圖5B）K8·凯发(中国【官网】集团天生赢家一触即发，表明DSF誘導的TXNIP表达依賴于銅離子熊猫体育中国app官网下载地址（官方）认证体育赛事直播平台K8·凯发(中国【官网】集团天生赢家一触即发球友会QY(千亿中国)有限公司-会员入口。动物实验也一致表明球客岛_球客直播_足球直播_体育直播_nba直播_球客岛，TXNIP是DSF发挥抗肿瘤作用的核心分子PA视讯·(中国区)官方网站 - Play。如圖5C所示球客岛_球客直播_足球直播_体育直播_nba直播_球客岛熊猫体育中国app官网下载地址（官方）认证体育赛事直播平台CQ9电子·(china)唯一官方网站，在接种TXNIP敲除的BRAFi耐藥細胞的小鼠中CQ9电子·(china)唯一官方网站PA视讯·(中国区)官方网站 - Play球友会-qy球友会-（中国）千亿球友会，Vem+DSF联合治疗的抑瘤效果显著减弱熊猫体育中国app官网下载地址（官方）认证体育赛事直播平台，表现为ko-TXNIP組肿瘤體积和重量均明显大于对照組（ko-NC）PA视讯·(中国区)官方网站 - Play熊猫体育中国app官网下载地址（官方）认证体育赛事直播平台杏宇平台|杏宇娱乐|杏宇引领传媒未来，说明TXNIP缺失几乎完全消除了联合治疗的疗效PA视讯·(中国区)官方网站 - Play球客岛_球客直播_足球直播_体育直播_nba直播_球客岛。以上體内外实验共同证实kg体育官网视讯(中文站) - 官方网站，TXNIP是介導Vem+DSF協同抗肿瘤作用的关键因子球友会-qy球友会-（中国）千亿球友会。

随后kg体育官网视讯(中文站) - 官方网站，通過STRING数据库对TXNIP的互作网络进行分析杏宇平台|杏宇娱乐|杏宇引领传媒未来CQ9电子·(china)唯一官方网站球客岛_球客直播_足球直播_体育直播_nba直播_球客岛，预测其與硫氧还蛋白（ThioredoxinPA视讯·(中国区)官方网站 - Playkg体育官网视讯(中文站) - 官方网站，TXN/TRX）家族成员（如TRX1、TRX2）存在强烈相互作用（圖5D）杏宇平台|杏宇娱乐|杏宇引领传媒未来。为进一步明确TXNIP的結合蛋白球友会-qy球友会-（中国）千亿球友会杏宇平台|杏宇娱乐|杏宇引领传媒未来PA视讯·(中国区)官方网站 - Play，研究人员对TXNIP免疫共沉淀产物进行蛋白質譜分析PA视讯·(中国区)官方网站 - Playkg体育官网视讯(中文站) - 官方网站K8·凯发(中国【官网】集团天生赢家一触即发，发现在Vem+DSF刺激下球友会QY(千亿中国)有限公司-会员入口kg体育官网视讯(中文站) - 官方网站K8·凯发(中国【官网】集团天生赢家一触即发，TRX1與TRX2的确與TXNIP发生显著結合（圖5E）PA视讯·(中国区)官方网站 - Play球友会-qy球友会-（中国）千亿球友会CQ9电子·(china)唯一官方网站。采用TXNIP與TRX互作抑制剂TXNIP-IN-1进行验证九游·会-(官网)真人游戏第一品牌球友会-qy球友会-（中国）千亿球友会，发现其预处理可完全抑制Vem+DSF引发的線粒體活性氧（mt-ROS）爆发K8·凯发(中国【官网】集团天生赢家一触即发，表明TXNIP正是通過結合TRX蛋白触发氧化應激（圖5F）杏宇平台|杏宇娱乐|杏宇引领传媒未来球友会QY(千亿中国)有限公司-会员入口kg体育官网视讯(中文站) - 官方网站。进一步利用siRNA分别敲低TXN1和TXN2球友会-qy球友会-（中国）千亿球友会，发现仅敲低TRX2可显著逆转Vem+DSF的細胞殺傷作用（圖5G）杏宇平台|杏宇娱乐|杏宇引领传媒未来球友会QY(千亿中国)有限公司-会员入口，说明TXNIP特异性通過抑制線粒體TRX2的抗氧化功能熊猫体育中国app官网下载地址（官方）认证体育赛事直播平台九游·会-(官网)真人游戏第一品牌球友会QY(千亿中国)有限公司-会员入口，導致耐藥黑色素瘤細胞中mt-ROS的积累kg体育官网视讯(中文站) - 官方网站球友会QY(千亿中国)有限公司-会员入口球客岛_球客直播_足球直播_体育直播_nba直播_球客岛。

綜上所述球友会-qy球友会-（中国）千亿球友会PA视讯·(中国区)官方网站 - Play杏宇平台|杏宇娱乐|杏宇引领传媒未来，通過整合转录組學、蛋白質組學及互作抑制实验九游·会-(官网)真人游戏第一品牌，本研究系统阐明了DSF/Cu²?通過上调TXNIP九游·会-(官网)真人游戏第一品牌，使其进入線粒體與TRX2結合并抑制其功能kg体育官网视讯(中文站) - 官方网站，从而解除对mt-ROS的抑制kg体育官网视讯(中文站) - 官方网站杏宇平台|杏宇娱乐|杏宇引领传媒未来熊猫体育中国app官网下载地址（官方）认证体育赛事直播平台，最终誘发氧化應激及細胞死亡的分子機制杏宇平台|杏宇娱乐|杏宇引领传媒未来熊猫体育中国app官网下载地址（官方）认证体育赛事直播平台kg体育官网视讯(中文站) - 官方网站。

文章總結

總結模型：DSF通過銅離子载體作用球友会QY(千亿中国)有限公司-会员入口PA视讯·(中国区)官方网站 - Play，誘導TXNIP上调球友会-qy球友会-（中国）千亿球友会，并與TRX2相互作用九游·会-(官网)真人游戏第一品牌熊猫体育中国app官网下载地址（官方）认证体育赛事直播平台球友会-qy球友会-（中国）千亿球友会，導致線粒體氧化應激和功能障礙CQ9电子·(china)唯一官方网站九游·会-(官网)真人游戏第一品牌，从而殺死BRAFi耐藥的黑色素瘤細胞球客岛_球客直播_足球直播_体育直播_nba直播_球客岛。

創新性與意義：

(1) 老藥新用：为安全性高的老藥DSF找到了克服肿瘤耐藥的全新應用场景kg体育官网视讯(中文站) - 官方网站。

(2) 機制新颖：首次揭示TXNIP-TRX2互作在DSF誘導的線粒體氧化損傷中的核心作用PA视讯·(中国区)官方网站 - Play，是一种非凋亡、非经典銅死亡（不依賴FDX1）的新機制PA视讯·(中国区)官方网站 - Play。

(3) 策略創新：提供了獨立于MAPK通路的克服耐藥新策略熊猫体育中国app官网下载地址（官方）认证体育赛事直播平台，具有重要的理论和临床意義球友会-qy球友会-（中国）千亿球友会。

(4) 临床展望：體内/體外实验均强烈提示DSF與BRAFi联用是一种极具潜力的联合疗法九游·会-(官网)真人游戏第一品牌CQ9电子·(china)唯一官方网站熊猫体育中国app官网下载地址（官方）认证体育赛事直播平台，有望快速进入临床研究K8·凯发(中国【官网】集团天生赢家一触即发球友会-qy球友会-（中国）千亿球友会，改善晚期黑色素瘤患者的预后熊猫体育中国app官网下载地址（官方）认证体育赛事直播平台球友会-qy球友会-（中国）千亿球友会球友会QY(千亿中国)有限公司-会员入口。