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空間轉錄組

DSP 空間轉錄組/蛋白质测序

DSP空間轉錄組/蛋白质测序——空间自定义区域转录组/蛋白质表达检测

  • 全面

    GeoMx Digital Spatial Profiler(DSP)是NanoString Technologies推出的新一代空间多靶标分析系统星空·体育(中国集团)官方网站澳门人威泥斯娱乐官方网站(中国)官方网站,结合了组织影像分析和测序定量技术澳门人威泥斯娱乐官方网站(中国)官方网站MG不朽情缘·(China)追求健康,你我一起成长,实现人和小鼠组织切片上18,000多种编码基因和140多种蛋白的定量分析澳·门人威·尼·斯·(中国)集团娱乐官方网站登录入口全站版MG不朽情缘·(China)追求健康,你我一起成长意昂4凯捷体育(中国)数字娱乐技术创新平台。

技術路線

  • 组织样本贴片后MG不朽情缘·(China)追求健康,你我一起成长澳门人威泥斯娱乐官方网站(中国)官方网站,利用DSP Oligo 标记探针/抗体和免疫熒光標記抗体对样本孵育;再通过显微扫描获取的荧光标记图像熊猫体育【Panda】官方网站- Panda SPORTS意昂4凯捷体育(中国)数字娱乐技术创新平台星空·体育(中国集团)官方网站,用于圈选感兴趣的区域(Region of Interest ROI);用UV光解每个ROI的DSP barcode(该barcode与基因是唯一对应关系)澳门人威泥斯娱乐官方网站(中国)官方网站,或对ROI内不同荧光标记区域分割后意昂体育·[官方网]有限公司官网球友(官方)App下载-球友直播熊猫体育【Panda】官方网站- Panda SPORTS,再光解 DSP barcode澳·门人威·尼·斯·(中国)集团娱乐官方网站登录入口全站版,实现基因表达水平定量澳门人威泥斯娱乐官方网站(中国)官方网站意昂4凯捷体育(中国)数字娱乐技术创新平台918博天堂(中国区)-官方网站。

    切片

    質控

    染色成像

    探針雜交

    建庫測序

    數據分析

定量試劑

  • 靶点特异性互补序列/抗体通过光可切割连接子与DSP barcode连接杏鑫|杏鑫平台注册·(中国)集团娱乐官方网站登录入口全站版澳·门人威·尼·斯·(中国)集团娱乐官方网站登录入口全站版。利用UV照射ROI释放并收取探针/抗体上的DSP barcode澳门人威泥斯娱乐官方网站(中国)官方网站星空·体育(中国集团)官方网站。由于DSP barcode与基因是唯一对应关系MG不朽情缘·(China)追求健康,你我一起成长,对收集的barcode序列建庫測序杏鑫|杏鑫平台注册·(中国)集团娱乐官方网站登录入口全站版,即可获取对应基因及其表达信息星空·体育(中国集团)官方网站。

DSP 转录组探针

  • 靶点特异性互补序列/抗体通过光可切割连接子与DSP barcode连接意昂体育·[官方网]有限公司官网意昂4凯捷体育(中国)数字娱乐技术创新平台澳门人威泥斯娱乐官方网站(中国)官方网站。利用UV照射ROI释放并收取探针/抗体上的DSP barcode熊猫体育【Panda】官方网站- Panda SPORTS球友(官方)App下载-球友直播杏鑫|杏鑫平台注册·(中国)集团娱乐官方网站登录入口全站版。由于DSP barcode与基因是唯一对应关系星空·体育(中国集团)官方网站意昂4凯捷体育(中国)数字娱乐技术创新平台,对收集的barcode序列建庫測序球友(官方)App下载-球友直播杏鑫|杏鑫平台注册·(中国)集团娱乐官方网站登录入口全站版,即可获取对应基因及其表达信息星空·体育(中国集团)官方网站918博天堂(中国区)-官方网站。
    物種 基因/通路
    Core CD45、Ki-67、Beta-2-microglobulin、CD31和6个 controls
    小鼠 CD45、Ki-67、CD31、GFP和6个 controls
    Module (14个) Immune Cell Typing、IO Drug Target、Immune Activation Status、Pan-Tumor、Cell Death、
    PI3K/AKT Signaling、MAPK Signaling、Myeloid、Neural Cell Typing、Alzheimer’s Disease
    Pathology、Alzheimer’s Disease Pathology Extended、Parkinson’s Disease Pathology、Glial Cell
    Subtyping、Autophagy
    人和小鼠

免疫熒光標記

  • DSP仪器支持4种荧光标记抗体染色成像(含核DNA荧光染料syto13)熊猫体育【Panda】官方网站- Panda SPORTS杏鑫|杏鑫平台注册·(中国)集团娱乐官方网站登录入口全站版。諾禾致源可提供PanCK、CD45、Iba1和Beta amyloid、 Syto13 (DNA) 等荧光标记抗体杏鑫|杏鑫平台注册·(中国)集团娱乐官方网站登录入口全站版星空·体育(中国集团)官方网站,同时支持客户自行购买适用于免疫熒光標記的直标抗体澳·门人威·尼·斯·(中国)集团娱乐官方网站登录入口全站版。
    Channel Excitation (peak/bandwidth) Emission (peak/bandwidth) Emission (peak/bandwidth) Suggested Fluorochromes Alzheimer
    FITC/525 nm 480 /28 nm 516/ 23 nm Syto13 (DNA)AF488 DNA
    Cy3/568 nm 538/ 19 nm 564/ 15 nm AF532、PE Syto83 (DNA) PanCK Iba1
    Texas Red/615 nm 588/ 19 nm 623/ 30 nm AF594 CD45 Texas Red/615 nm
    Cy5/666 nm 645/ 19 nm 583/ 30 nm AF647 Dylight 650

圈選方式

  • DSP平台根据研究目的选择任何感兴趣的组织区域(region of interesting, ROI)检测RNA或蛋白质表达水平澳门人威泥斯娱乐官方网站(中国)官方网站。DSP平台提供多种ROI的选择方式:几何圈选、分割圈选、散在细胞类型圈选、等高线圈选、网格圈选杏鑫|杏鑫平台注册·(中国)集团娱乐官方网站登录入口全站版澳·门人威·尼·斯·(中国)集团娱乐官方网站登录入口全站版。

信息分析

  • 数据经过严格質控澳门人威泥斯娱乐官方网站(中国)官方网站球友(官方)App下载-球友直播意昂体育·[官方网]有限公司官网,采用NanoString官方推出的分析流程MG不朽情缘·(China)追求健康,你我一起成长星空·体育(中国集团)官方网站,完成ROI 差异表达分析和功能富集分析等内容意昂4凯捷体育(中国)数字娱乐技术创新平台澳门人威泥斯娱乐官方网站(中国)官方网站,确保数据分 析准确性和可靠性杏鑫|杏鑫平台注册·(中国)集团娱乐官方网站登录入口全站版。
    分析內容
    數據截取與比對 樣本一致性
    样本質控 差異表達基因分析
    探针質控 GO富集分析
    數據歸一化 KEGG 富集分析
    聚類/降維 Reactome 富集分析

送樣建議

  • 樣本類型 送樣量/樣 保存條件 運輸條件
    OCT包埋冰凍組織塊 1塊 密封後澳·门人威·尼·斯·(中国)集团娱乐官方网站登录入口全站版球友(官方)App下载-球友直播,-80℃保存包埋盒外標注切割面 冰袋運輸
    FFPE 组织块 1塊 密封後球友(官方)App下载-球友直播,4℃保存 冰袋運輸
    冰凍切片 ≥ 4张切片(邻片) 切片厚度~5 μm 使用防脫片載玻片貼片;密封後杏鑫|杏鑫平台注册·(中国)集团娱乐官方网站登录入口全站版球友(官方)App下载-球友直播意昂4凯捷体育(中国)数字娱乐技术创新平台,-80℃保存 冰袋運輸
    FFPE 切片 ≥ 4张切片(邻片)切片厚度4~6 μm 使用防脫片載玻片貼片;玻片幹燥密封澳·门人威·尼·斯·(中国)集团娱乐官方网站登录入口全站版意昂4凯捷体育(中国)数字娱乐技术创新平台,4℃保存時間<14天 冰袋運輸

應用方向


常見問題

  • 1. 免疫荧光抗体怎么岩獍禾逵官方网]有限公司官网球友(官方)App下载-球友直播。

    • 免疫熒光標記是DSP空间组学研究的初始步骤之一星空·体育(中国集团)官方网站澳·门人威·尼·斯·(中国)集团娱乐官方网站登录入口全站版,也是重要的环节澳门人威泥斯娱乐官方网站(中国)官方网站。DSP仪器具有4个荧光通道MG不朽情缘·(China)追求健康,你我一起成长澳门人威泥斯娱乐官方网站(中国)官方网站,可以对应检测4种荧光标记;通常FITC通道用作核染球友(官方)App下载-球友直播意昂体育·[官方网]有限公司官网,其余三个检测特异性抗体荧光标记意昂4凯捷体育(中国)数字娱乐技术创新平台。关于免疫熒光標記抗体选择918博天堂(中国区)-官方网站意昂4凯捷体育(中国)数字娱乐技术创新平台澳门人威泥斯娱乐官方网站(中国)官方网站,有以下几种方案:
      (1)采用諾禾致源提供的直标抗体杏鑫|杏鑫平台注册·(中国)集团娱乐官方网站登录入口全站版,包含PanCK、CD45、Iba1、Beta amyloid 和 Syto13 (DNA)意昂4凯捷体育(中国)数字娱乐技术创新平台。
      (2)如果所需抗体不在諾禾致源提供范围内意昂体育·[官方网]有限公司官网熊猫体育【Panda】官方网站- Panda SPORTSMG不朽情缘·(China)追求健康,你我一起成长,支持自行购买适用于免疫熒光標記的直标抗体(即一抗偶联荧光基团的免疫熒光標記抗体)MG不朽情缘·(China)追求健康,你我一起成长球友(官方)App下载-球友直播,抗体荧光符合DSP仪器荧光通道意昂4凯捷体育(中国)数字娱乐技术创新平台杏鑫|杏鑫平台注册·(中国)集团娱乐官方网站登录入口全站版。
      (3)如果没有供应商提供所需直标抗体商品918博天堂(中国区)-官方网站,支持自行购买适用于免疫荧光的一抗和荧光染料意昂4凯捷体育(中国)数字娱乐技术创新平台星空·体育(中国集团)官方网站MG不朽情缘·(China)追求健康,你我一起成长,寄送至諾禾致源将一抗与荧光染料偶联进行免疫熒光標記澳·门人威·尼·斯·(中国)集团娱乐官方网站登录入口全站版杏鑫|杏鑫平台注册·(中国)集团娱乐官方网站登录入口全站版,染料荧光信号需符合DSP仪器荧光通道熊猫体育【Panda】官方网站- Panda SPORTS918博天堂(中国区)-官方网站。
      按以上順序依次爲優先推薦選項
  • 2. DSP 空間轉錄組/蛋白质测序如何准备样本杏鑫|杏鑫平台注册·(中国)集团娱乐官方网站登录入口全站版918博天堂(中国区)-官方网站星空·体育(中国集团)官方网站?

    • DSP 空間轉錄組支持OCT包埋冰冻组织、FFPE石蜡块、冰凍切片和FFPE切片等样本送样澳门人威泥斯娱乐官方网站(中国)官方网站。冰冻组织(干冰运输)和FFPE石蜡块(冰袋運輸)包埋好后球友(官方)App下载-球友直播,寄送至諾禾致源杏鑫|杏鑫平台注册·(中国)集团娱乐官方网站登录入口全站版熊猫体育【Panda】官方网站- Panda SPORTS星空·体育(中国集团)官方网站。冰凍切片和FFPE切片需要贴在防脱片载玻片上意昂4凯捷体育(中国)数字娱乐技术创新平台918博天堂(中国区)-官方网站星空·体育(中国集团)官方网站,密封保存寄送至諾禾致源MG不朽情缘·(China)追求健康,你我一起成长,冰凍切片采用干冰运输MG不朽情缘·(China)追求健康,你我一起成长意昂体育·[官方网]有限公司官网,FFPE切片采用冰袋運輸澳·门人威·尼·斯·(中国)集团娱乐官方网站登录入口全站版。组织切片贴在下图绿色区域内、没有皱着和破损熊猫体育【Panda】官方网站- Panda SPORTS意昂体育·[官方网]有限公司官网星空·体育(中国集团)官方网站,否则将无法获取DSP空间数据星空·体育(中国集团)官方网站澳·门人威·尼·斯·(中国)集团娱乐官方网站登录入口全站版意昂体育·[官方网]有限公司官网。

      圖注:淺藍色邊框爲載玻片大蠱G不朽情缘·(China)追求健康,你我一起成长。簧钏{色六邊形爲儀器固定區域;綠色矩形爲貼片區域和儀器捕獲範圍
  • 3. DSP 空間轉錄組与10x Visium 空間轉錄組有什么区别澳门人威泥斯娱乐官方网站(中国)官方网站澳·门人威·尼·斯·(中国)集团娱乐官方网站登录入口全站版意昂4凯捷体育(中国)数字娱乐技术创新平台?

    • DSP空間轉錄組可以自定义圈选组织位置检测转录组或蛋白质测序澳·门人威·尼·斯·(中国)集团娱乐官方网站登录入口全站版,检测的组织面积是14.6mm*36.2mm星空·体育(中国集团)官方网站澳门人威泥斯娱乐官方网站(中国)官方网站,支持的送样类型更多;10x Visium 空間轉錄組对整张组织切片无偏检测转录组表达水平杏鑫|杏鑫平台注册·(中国)集团娱乐官方网站登录入口全站版,可检测组织面积6.5mm*6.5mm球友(官方)App下载-球友直播杏鑫|杏鑫平台注册·(中国)集团娱乐官方网站登录入口全站版。具体参数如下表所示:

      10x Genomics Visium NanoString GeoMx DSP
      組織兼容性 包埋冷凍樣本 FFPE石蠟樣本 包埋冷凍樣本、FFPE样本、冰凍切片、FFPE切片
      RNA質檢 RIN值>=7 DV200>=50% 無明確要求
      組織貼片 10x Visium专用玻片 防脫片玻片
      組織大小 6.5mm*6.5mm 14.6mm*36.2mm
      檢測區域 捕獲框內mRNA無偏檢測 自定義的感興趣區域(ROIs)
      細胞分辨率 1-10個細胞/spot >100個細胞/ROI
      捕獲的RNA方式 poly(A)捕獲 特异性探針雜交 特异性探針雜交
      測序深度要求 5w read pairs/spot 2.5w read pairs/spot 100 read pairs/μm2
      物種限制 無限制 人和小鼠 人和小鼠

      表2 DSP与10x Visium 空间轉錄組測序参数比较

更多內容澳·门人威·尼·斯·(中国)集团娱乐官方网站登录入口全站版918博天堂(中国区)-官方网站澳门人威泥斯娱乐官方网站(中国)官方网站,可掃描側邊欄"一對一業務咨詢"二維碼添加科研服務經理咨詢球友(官方)App下载-球友直播。

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