基因組測序>
建庫測序>
人类基因組測序>
动植物基因組測序>
微生物基因組測序>
轉錄調控測序>
表觀組測序>
單細胞測序>
空間轉錄組>
基因分型>
質譜分析>
蛋白組學分析>
代謝組學分析>
血液蛋白質組分析>
多組學聯合分析>
分子育種>
基因合成>
DSP空間轉錄組/蛋白质测序——空间自定义区域转录组/蛋白质表达检测
全面
GeoMx
Digital Spatial Profiler(DSP)是NanoString
Technologies推出的新一代空间多靶标分析系统星空·体育(中国集团)官方网站澳门人威泥斯娱乐官方网站(中国)官方网站,结合了组织影像分析和测序定量技术澳门人威泥斯娱乐官方网站(中国)官方网站MG不朽情缘·(China)追求健康,你我一起成长,实现人和小鼠组织切片上18,000多种编码基因和140多种蛋白的定量分析澳·门人威·尼·斯·(中国)集团娱乐官方网站登录入口全站版MG不朽情缘·(China)追求健康,你我一起成长意昂4凯捷体育(中国)数字娱乐技术创新平台。
技術路線
切片
質控
染色成像
探針雜交
建庫測序
數據分析
定量試劑
DSP 转录组探针
| 物種 | 基因/通路 | |
|---|---|---|
| Core | 人 | CD45、Ki-67、Beta-2-microglobulin、CD31和6个 controls |
| 小鼠 | CD45、Ki-67、CD31、GFP和6个 controls | |
| Module (14个) |
Immune Cell Typing、IO Drug Target、Immune Activation Status、Pan-Tumor、Cell Death、
PI3K/AKT Signaling、MAPK Signaling、Myeloid、Neural Cell Typing、Alzheimer’s Disease Pathology、Alzheimer’s Disease Pathology Extended、Parkinson’s Disease Pathology、Glial Cell Subtyping、Autophagy |
|
| 人和小鼠 | ||
免疫熒光標記
| Channel | Excitation (peak/bandwidth) | Emission (peak/bandwidth) | Emission (peak/bandwidth) | Suggested Fluorochromes | Alzheimer |
|---|---|---|---|---|---|
| FITC/525 nm | 480 /28 nm | 516/ 23 nm | Syto13 (DNA)AF488 | DNA | |
| Cy3/568 nm | 538/ 19 nm | 564/ 15 nm | AF532、PE Syto83 (DNA) | PanCK | Iba1 |
| Texas Red/615 nm | 588/ 19 nm | 623/ 30 nm | AF594 | CD45 | Texas Red/615 nm |
| Cy5/666 nm | 645/ 19 nm | 583/ 30 nm | AF647 Dylight 650 | ||
圈選方式
信息分析
| 分析內容 | |
|---|---|
| 數據截取與比對 | 樣本一致性 |
| 样本質控 | 差異表達基因分析 |
| 探针質控 | GO富集分析 |
| 數據歸一化 | KEGG 富集分析 |
| 聚類/降維 | Reactome 富集分析 |
送樣建議
| 樣本類型 | 送樣量/樣 | 保存條件 | 運輸條件 |
|---|---|---|---|
| OCT包埋冰凍組織塊 | 1塊 | 密封後澳·门人威·尼·斯·(中国)集团娱乐官方网站登录入口全站版球友(官方)App下载-球友直播,-80℃保存包埋盒外標注切割面 | 冰袋運輸 |
| FFPE 组织块 | 1塊 | 密封後球友(官方)App下载-球友直播,4℃保存 | 冰袋運輸 |
| 冰凍切片 | ≥ 4张切片(邻片) 切片厚度~5 μm | 使用防脫片載玻片貼片;密封後杏鑫|杏鑫平台注册·(中国)集团娱乐官方网站登录入口全站版球友(官方)App下载-球友直播意昂4凯捷体育(中国)数字娱乐技术创新平台,-80℃保存 | 冰袋運輸 |
| FFPE 切片 | ≥ 4张切片(邻片)切片厚度4~6 μm | 使用防脫片載玻片貼片;玻片幹燥密封澳·门人威·尼·斯·(中国)集团娱乐官方网站登录入口全站版意昂4凯捷体育(中国)数字娱乐技术创新平台,4℃保存時間<14天 | 冰袋運輸 |
應用方向
常見問題
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| 10x Genomics Visium | NanoString GeoMx DSP | ||
|---|---|---|---|
| 組織兼容性 | 包埋冷凍樣本 | FFPE石蠟樣本 | 包埋冷凍樣本、FFPE样本、冰凍切片、FFPE切片 |
| RNA質檢 | RIN值>=7 | DV200>=50% | 無明確要求 |
| 組織貼片 | 10x Visium专用玻片 | 防脫片玻片 | |
| 組織大小 | 6.5mm*6.5mm | 14.6mm*36.2mm | |
| 檢測區域 | 捕獲框內mRNA無偏檢測 | 自定義的感興趣區域(ROIs) | |
| 細胞分辨率 | 1-10個細胞/spot | >100個細胞/ROI | |
| 捕獲的RNA方式 | poly(A)捕獲 | 特异性探針雜交 | 特异性探針雜交 |
| 測序深度要求 | 5w read pairs/spot | 2.5w read pairs/spot | 100 read pairs/μm2 |
| 物種限制 | 無限制 | 人和小鼠 | 人和小鼠 |
表2 DSP与10x Visium 空间轉錄組測序参数比较
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