1.真核轉錄組

• 1.1 组织样本

  a. 植物组织：
  ? 成熟部位,例如植物茎、根、种子等部位建议2倍以上送样
  ? 需要清洗的样本熊猫体育【体育中国】直播平台官方网站，可以无菌水或75%乙醇冲洗表面杏耀_杏耀娱乐登录_杏耀注册代理平台官网杏鑫平台|杏鑫娱乐-专为杏鑫提供注册登录服务的网站，吸水纸吸干
  ? 样本离体后杏鑫平台|杏鑫娱乐-专为杏鑫提供注册登录服务的网站杏耀_杏耀娱乐登录_杏耀注册代理平台官网lehu·乐虎-(88国际)官方网站有限公司，在冰上立即分割50-100mg小块杏鑫平台|杏鑫娱乐-专为杏鑫提供注册登录服务的网站，2-3管备份J9九游|会(中国)最新J.9官网网站-真人游戏第一品牌杏耀_杏耀娱乐登录_杏耀注册代理平台官网PG(官方电子平台)有限公司-China直营官方网站，放置冻存管并立即液氮速冻杏鑫平台|杏鑫娱乐-专为杏鑫提供注册登录服务的网站熊猫体育【体育中国】直播平台官方网站，放置-80℃保存,避免未经速冻直接放-80℃保存
  ? 不建议使用RNAlater等RNA?保护试剂保存植物组织样品；因为植物细胞含有细胞壁J9九游|会(中国)最新J.9官网网站-真人游戏第一品牌，RNA保护试剂很难渗透
  ? 不建议使用TRIzol保存；TRIzol法并不适用于萃取大多数植物样本PG(官方电子平台)有限公司-China直营官方网站lehu·乐虎-(88国际)官方网站有限公司杏耀_杏耀娱乐登录_杏耀注册代理平台官网，植物组织中的RNA提取多采用专门的提取试剂盒球友(官方)App下载-球友直播，而TRIzol保存会影响试剂盒提取液的提取效果 b. 动物组织：
  ? 对于动物组织杏耀_杏耀娱乐登录_杏耀注册代理平台官网PG(官方电子平台)有限公司-China直营官方网站意昂4凯捷体育(中国)数字娱乐技术创新平台，建议选用新鲜样本J9九游|会(中国)最新J.9官网网站-真人游戏第一品牌意昂体育·[官方网]有限公司官网，采集样品时应选取核酸含量较多的部位；核酸不丰富部位,例如脂肪、成熟皮肤、骨头等部位建议酌情增加送样量
  ? 生理盐水漂洗；剔除结缔组织等非研究组织
  ? 样本离体后意昂体育·[官方网]有限公司官网意昂4凯捷体育(中国)数字娱乐技术创新平台J9九游|会(中国)最新J.9官网网站-真人游戏第一品牌，在冰上立即分割50-100mg小块意昂体育·[官方网]有限公司官网杏耀_杏耀娱乐登录_杏耀注册代理平台官网，2-3管备份杏耀_杏耀娱乐登录_杏耀注册代理平台官网意昂体育·[官方网]有限公司官网，放置冻存管并立即液氮速冻球友(官方)App下载-球友直播意昂4凯捷体育(中国)数字娱乐技术创新平台，放置-80℃保存,避免未经速冻直接放-80℃保存
  ? 无法及时用液氮速冻保存的样本PG(官方电子平台)有限公司-China直营官方网站，可采用RNAlater等RNA保护液进行送样熊猫体育【体育中国】直播平台官方网站PG(官方电子平台)有限公司-China直营官方网站意昂4凯捷体育(中国)数字娱乐技术创新平台，注意完全按照RNA保护液操作lehu·乐虎-(88国际)官方网站有限公司J9九游|会(中国)最新J.9官网网站-真人游戏第一品牌杏鑫平台|杏鑫娱乐-专为杏鑫提供注册登录服务的网站，尽量使组织块尺寸保持在5mm左右杏鑫平台|杏鑫娱乐-专为杏鑫提供注册登录服务的网站，过小不利于样本收集J9九游|会(中国)最新J.9官网网站-真人游戏第一品牌意昂4凯捷体育(中国)数字娱乐技术创新平台杏耀_杏耀娱乐登录_杏耀注册代理平台官网，过大则保护液不能均匀的渗透到组织博天堂(918)官方网站 - 让你更精彩。切记不可先-80℃冻存后取出放入RNAlater浸润
  ? 动物样本可加裂解液（TRIzol,或其他同TRIzol使用方法一致的裂解液）；如果使用TRIzol裂解液保存送样博天堂(918)官方网站 - 让你更精彩lehu·乐虎-(88国际)官方网站有限公司J9九游|会(中国)最新J.9官网网站-真人游戏第一品牌，请务必先进行液氮研磨破碎杏耀_杏耀娱乐登录_杏耀注册代理平台官网球友(官方)App下载-球友直播J9九游|会(中国)最新J.9官网网站-真人游戏第一品牌，然后溶于TRIzol中液氮速冻；-80℃保存 c. 细胞样本
  ? 生长状态良好的悬浮细胞或贴壁细胞
  ? 悬浮细胞：每5×10⁶個细胞(非送样量)加入1ml TRIzol试剂PG(官方电子平台)有限公司-China直营官方网站意昂体育·[官方网]有限公司官网，用枪头反复抽打细胞博天堂(918)官方网站 - 让你更精彩，直至看不见成团的细胞块杏鑫平台|杏鑫娱乐-专为杏鑫提供注册登录服务的网站球友(官方)App下载-球友直播，整個溶液呈清亮而不粘稠的状态；转移到的离心管中球友(官方)App下载-球友直播，液氮速冻杏鑫平台|杏鑫娱乐-专为杏鑫提供注册登录服务的网站熊猫体育【体育中国】直播平台官方网站意昂体育·[官方网]有限公司官网，放置-80℃保存
  ? 贴壁细胞按每10cm²培养面积（相当于六孔板一個孔或35mm直径培养皿）加1ml TRIzol试剂；用枪头反复吹打lehu·乐虎-(88国际)官方网站有限公司球友(官方)App下载-球友直播博天堂(918)官方网站 - 让你更精彩，使TRIzol接触所有长有细胞的培养瓶表面杏鑫平台|杏鑫娱乐-专为杏鑫提供注册登录服务的网站J9九游|会(中国)最新J.9官网网站-真人游戏第一品牌，并进行充分消化意昂4凯捷体育(中国)数字娱乐技术创新平台，反复抽打细胞直至看不见成团的细胞块；转移到离心管中熊猫体育【体育中国】直播平台官方网站，液氮速冻PG(官方电子平台)有限公司-China直营官方网站，放置-80℃保存
  ? 此外PG(官方电子平台)有限公司-China直营官方网站杏耀_杏耀娱乐登录_杏耀注册代理平台官网，也可将细胞用PBS缓冲液快速洗一次J9九游|会(中国)最新J.9官网网站-真人游戏第一品牌，离心之后收集得到细胞沉淀J9九游|会(中国)最新J.9官网网站-真人游戏第一品牌杏鑫平台|杏鑫娱乐-专为杏鑫提供注册登录服务的网站杏耀_杏耀娱乐登录_杏耀注册代理平台官网，液氮速冻杏鑫平台|杏鑫娱乐-专为杏鑫提供注册登录服务的网站，放置-80℃保存 d. 血液样本：
  ? 血液相关的产品只接全血或分离的细胞样本杏鑫平台|杏鑫娱乐-专为杏鑫提供注册登录服务的网站球友(官方)App下载-球友直播，不接血清/血浆
  ? 常见血液样本处理方法：
  （1）TRIzol法；
  （2）PAXgene RNA tube法（全血样本更推荐此保存方法意昂体育·[官方网]有限公司官网博天堂(918)官方网站 - 让你更精彩，需自备BD管保存送样）；
  （3）離心分離得到白細胞或者PBMClehu·乐虎-(88国际)官方网站有限公司杏耀_杏耀娱乐登录_杏耀注册代理平台官网。
  除上述三種外杏鑫平台|杏鑫娱乐-专为杏鑫提供注册登录服务的网站，全血樣本也可不做處理杏耀_杏耀娱乐登录_杏耀注册代理平台官网lehu·乐虎-(88国际)官方网站有限公司球友(官方)App下载-球友直播，直接液氮速凍熊猫体育【体育中国】直播平台官方网站杏耀_杏耀娱乐登录_杏耀注册代理平台官网，但由于血液中RNA含量低杏鑫平台|杏鑫娱乐-专为杏鑫提供注册登录服务的网站博天堂(918)官方网站 - 让你更精彩熊猫体育【体育中国】直播平台官方网站，同時血細胞容易破裂、釋放RNA酶球友(官方)App下载-球友直播，造成RNA降解PG(官方电子平台)有限公司-China直营官方网站杏耀_杏耀娱乐登录_杏耀注册代理平台官网，所以提取成功率低
  ? TRIzol法：先把血液放到抗凝管里意昂体育·[官方网]有限公司官网博天堂(918)官方网站 - 让你更精彩，震荡混匀杏耀_杏耀娱乐登录_杏耀注册代理平台官网J9九游|会(中国)最新J.9官网网站-真人游戏第一品牌，使血液和抗凝剂充分混合PG(官方电子平台)有限公司-China直营官方网站杏耀_杏耀娱乐登录_杏耀注册代理平台官网，再抽出一部分和TRIzol混匀熊猫体育【体育中国】直播平台官方网站PG(官方电子平台)有限公司-China直营官方网站杏耀_杏耀娱乐登录_杏耀注册代理平台官网，TRIzol和血的比例=3：1PG(官方电子平台)有限公司-China直营官方网站，震荡混匀意昂体育·[官方网]有限公司官网博天堂(918)官方网站 - 让你更精彩熊猫体育【体育中国】直播平台官方网站，不要有血块博天堂(918)官方网站 - 让你更精彩J9九游|会(中国)最新J.9官网网站-真人游戏第一品牌PG(官方电子平台)有限公司-China直营官方网站，液氮速冻杏耀_杏耀娱乐登录_杏耀注册代理平台官网球友(官方)App下载-球友直播意昂体育·[官方网]有限公司官网，-80℃冻存意昂4凯捷体育(中国)数字娱乐技术创新平台杏鑫平台|杏鑫娱乐-专为杏鑫提供注册登录服务的网站球友(官方)App下载-球友直播，干冰寄送
  ? 因轉錄組測序分析对RNA质量要求较高J9九游|会(中国)最新J.9官网网站-真人游戏第一品牌博天堂(918)官方网站 - 让你更精彩意昂4凯捷体育(中国)数字娱乐技术创新平台，建议30天内送样进行RNA提取
  e. 菌体：
  ? 建议收集液体培养基中对数生长期的菌体
  ? 通过低速离心收集菌体并尽可能将培养基去除干净杏鑫平台|杏鑫娱乐-专为杏鑫提供注册登录服务的网站，然后用无菌水或PBS缓冲液冲洗样品1~3遍意昂体育·[官方网]有限公司官网，送菌液沉淀
  ? 不建议用RNAlater保存熊猫体育【体育中国】直播平台官方网站，因为RNAlater密度较大lehu·乐虎-(88国际)官方网站有限公司，取时不易分离菌体
  ? 不建议加入裂解液博天堂(918)官方网站 - 让你更精彩lehu·乐虎-(88国际)官方网站有限公司，细菌的提取一般使用试剂盒
  ? 不建议加TRIzol意昂体育·[官方网]有限公司官网PG(官方电子平台)有限公司-China直营官方网站，影响菌体裂解
  ? 直接送滤膜时球友(官方)App下载-球友直播，建议送样≥5张意昂体育·[官方网]有限公司官网，不要将多张滤膜叠在一起后速冻寄送PG(官方电子平台)有限公司-China直营官方网站博天堂(918)官方网站 - 让你更精彩，将滤膜一张一张放入50ml离心管J9九游|会(中国)最新J.9官网网站-真人游戏第一品牌PG(官方电子平台)有限公司-China直营官方网站杏鑫平台|杏鑫娱乐-专为杏鑫提供注册登录服务的网站，液氮速15min意昂4凯捷体育(中国)数字娱乐技术创新平台球友(官方)App下载-球友直播，-80℃冻存熊猫体育【体育中国】直播平台官方网站意昂体育·[官方网]有限公司官网lehu·乐虎-(88国际)官方网站有限公司，干冰寄送
  f. FFPE样本：
  ? 福尔马林固定后石蜡包埋的组织简称为FFPE样品
  ? 送样要求：
  1）厚度在5-10μmPG(官方电子平台)有限公司-China直营官方网站，組織面積大于25mm²的切片12張；
  2）FFPE樣本常溫或者冰袋寄送即可
  ? 样本准备建议：
  1）獲得樣本後意昂体育·[官方网]有限公司官网，盡快開始固定；
  2）將樣本切薄再浸泡（5-10um或更薄最好）；
  3）避免過度固定PG(官方电子平台)有限公司-China直营官方网站，浸泡時間過長；
  4）純化的樣品最好是固定或者包埋時間在半年內的樣本博天堂(918)官方网站 - 让你更精彩熊猫体育【体育中国】直播平台官方网站，放置時間越長杏鑫平台|杏鑫娱乐-专为杏鑫提供注册登录服务的网站，對RNA純化越不利
  ? 提示：为保证实验的顺利意昂体育·[官方网]有限公司官网球友(官方)App下载-球友直播PG(官方电子平台)有限公司-China直营官方网站，建议样本备份1-2份意昂体育·[官方网]有限公司官网意昂4凯捷体育(中国)数字娱乐技术创新平台，以防备部分样本降解重新取材、制备或送样J9九游|会(中国)最新J.9官网网站-真人游戏第一品牌球友(官方)App下载-球友直播，耽误时间

  樣本類型	核鏈特轉錄組
  新鮮植物組織幹重	叶片、花 ≥ 0.3g； 根、茎、种子等其他组织 ≥ 0.5g
  新鮮動物組織幹重	内脏组织、脑组织 ≥ 0.08g； 脂肪、皮肤、骨头、血管等其他组织 ≥ 0.3
  新鮮培養細胞	>≥5*106個
  新采集的全血(加入 TRIzol)	>≥5mL
  新采集的全血 (液氮速冻)	>≥2mL
  PAXgene 采血管	≥1 管
  石蠟切片	厚度在5-10μm,含組織面積大于25mm2的切片12張意昂体育·[官方网]有限公司官网PG(官方电子平台)有限公司-China直营官方网站。
  菌體/菌絲	>3*106個 >0.3g
  半固體細菌	≥ 0.5mL

  
  

• 1.2 核酸样本

  ? 针对核酸有杂质、污染、粘稠、颜色等情况意昂体育·[官方网]有限公司官网lehu·乐虎-(88国际)官方网站有限公司，需要过柱纯化后送样或者酌情增加送样量
  ? 核酸样品建议使用1.5ml、2ml EP管装载样品意昂4凯捷体育(中国)数字娱乐技术创新平台博天堂(918)官方网站 - 让你更精彩杏耀_杏耀娱乐登录_杏耀注册代理平台官网，其他保存管容易破裂且不利于保存样品和后续实验的开展
  ? 为了防止样品污染和混淆熊猫体育【体育中国】直播平台官方网站，禁止使用96孔板和深孔板装载样品
  ? 用乙醇沉淀的样品由于运输中会有少量乙醇挥发PG(官方电子平台)有限公司-China直营官方网站熊猫体育【体育中国】直播平台官方网站球友(官方)App下载-球友直播，建议将样品管盖用封口膜缠绕4-5圈

  樣本類型	普通轉錄組文庫	真核鏈特文庫
  total RNA	浓度：≥ 50ng/μL 体积：20μL ≤ V ≤ 120μL 总量：≥ 800ng	浓度：≥ 50ng/μL 体积：20μL ≤ V ≤ 120μL 总量：≥ 800ng

  因部分客户核酸含有杂质、颜色等物质导致会产生大量损失球友(官方)App下载-球友直播，为保证您的样本一次检测合格并节约宝贵的重送样时间杏鑫平台|杏鑫娱乐-专为杏鑫提供注册登录服务的网站熊猫体育【体育中国】直播平台官方网站球友(官方)App下载-球友直播，送樣建議量是高于公司判定标准的球友(官方)App下载-球友直播杏耀_杏耀娱乐登录_杏耀注册代理平台官网意昂体育·[官方网]有限公司官网，请您在核酸量足够的前提下尽量按照送樣建議来送样球友(官方)App下载-球友直播杏耀_杏耀娱乐登录_杏耀注册代理平台官网，感谢您的大力支持与配合杏鑫平台|杏鑫娱乐-专为杏鑫提供注册登录服务的网站。
  

2 样本打包及寄送建议

• 2.1 样本的打包

  （1）核酸样品建议使用质量好的1.5ml或2ml 低吸附EP管装载样品杏耀_杏耀娱乐登录_杏耀注册代理平台官网J9九游|会(中国)最新J.9官网网站-真人游戏第一品牌，并用封口膜封口J9九游|会(中国)最新J.9官网网站-真人游戏第一品牌熊猫体育【体育中国】直播平台官方网站球友(官方)App下载-球友直播。为了防止样品管破裂博天堂(918)官方网站 - 让你更精彩意昂4凯捷体育(中国)数字娱乐技术创新平台，或者污染和混乱杏耀_杏耀娱乐登录_杏耀注册代理平台官网lehu·乐虎-(88国际)官方网站有限公司球友(官方)App下载-球友直播，请不要使用诸如PCR管、0.5ml EP管、八联管、96孔板、深孔板等非标准管送样意昂体育·[官方网]有限公司官网。非标准管不利于样品保存以及后续实验的进行PG(官方电子平台)有限公司-China直营官方网站熊猫体育【体育中国】直播平台官方网站。如有样品使用非标准管制备球友(官方)App下载-球友直播意昂4凯捷体育(中国)数字娱乐技术创新平台，还请在送样前自行转管处理球友(官方)App下载-球友直播。
  （2）組織樣本建議根據送樣量使用合適規格帶螺紋帽的EP管、凍存管或者離心管裝載組織樣品杏耀_杏耀娱乐登录_杏耀注册代理平台官网，並用封口膜封口J9九游|会(中国)最新J.9官网网站-真人游戏第一品牌。
  （3）爲防止樣品管在運輸過程中受到幹冰擠壓破裂杏鑫平台|杏鑫娱乐-专为杏鑫提供注册登录服务的网站lehu·乐虎-(88国际)官方网站有限公司，最好將樣品管放到50ml離心管或其他支撐物中球友(官方)App下载-球友直播，並在支撐物裏添加棉花或衛生紙緩沖球友(官方)App下载-球友直播杏鑫平台|杏鑫娱乐-专为杏鑫提供注册登录服务的网站意昂体育·[官方网]有限公司官网。大量樣品建議將EP管放置在凍存盒中lehu·乐虎-(88国际)官方网站有限公司熊猫体育【体育中国】直播平台官方网站J9九游|会(中国)最新J.9官网网站-真人游戏第一品牌，並在凍存盒外面包裹氣泡墊意昂4凯捷体育(中国)数字娱乐技术创新平台J9九游|会(中国)最新J.9官网网站-真人游戏第一品牌lehu·乐虎-(88国际)官方网站有限公司。如使用錫箔紙、自封袋裝載的樣品意昂4凯捷体育(中国)数字娱乐技术创新平台意昂体育·[官方网]有限公司官网，爲防止運輸中受擠壓破損lehu·乐虎-(88国际)官方网站有限公司杏耀_杏耀娱乐登录_杏耀注册代理平台官网博天堂(918)官方网站 - 让你更精彩，建議將錫箔紙折疊整齊裝在自封袋中PG(官方电子平台)有限公司-China直营官方网站lehu·乐虎-(88国际)官方网站有限公司杏鑫平台|杏鑫娱乐-专为杏鑫提供注册登录服务的网站，在樣品包裝外再用氣泡墊包好並固定意昂体育·[官方网]有限公司官网球友(官方)App下载-球友直播。
  （4）对于血液样品lehu·乐虎-(88国际)官方网站有限公司球友(官方)App下载-球友直播熊猫体育【体育中国】直播平台官方网站，建议采用5-10ml 塑料抗凝采血管装载杏鑫平台|杏鑫娱乐-专为杏鑫提供注册登录服务的网站，为了防止运输过程中采血管因挤压而损坏J9九游|会(中国)最新J.9官网网站-真人游戏第一品牌球友(官方)App下载-球友直播意昂4凯捷体育(中国)数字娱乐技术创新平台，需要将每支采血管管身均用气泡垫包好意昂体育·[官方网]有限公司官网熊猫体育【体育中国】直播平台官方网站，然后放置到塑料或纸质包装盒中意昂体育·[官方网]有限公司官网意昂4凯捷体育(中国)数字娱乐技术创新平台。
  （5）用乙醇沈澱的樣品由于運輸中會有少量乙醇揮發出熊猫体育【体育中国】直播平台官方网站，建議將樣品管蓋用封口膜纏繞4-5圈熊猫体育【体育中国】直播平台官方网站球友(官方)App下载-球友直播。
  （6）爲便于處理和保存杏耀_杏耀娱乐登录_杏耀注册代理平台官网博天堂(918)官方网站 - 让你更精彩，組織樣品送樣量請不要超過建議送樣量的5倍（特殊的得率較低的樣品除外）lehu·乐虎-(88国际)官方网站有限公司。

• 2.2 样本的名称标识

  （1）所有的樣品必須具有清晰的標記熊猫体育【体育中国】直播平台官方网站J9九游|会(中国)最新J.9官网网站-真人游戏第一品牌意昂4凯捷体育(中国)数字娱乐技术创新平台，並且簡潔明了J9九游|会(中国)最新J.9官网网站-真人游戏第一品牌。
  （2）使用錫箔紙包裝的組織樣品建議在錫箔紙內外均標記樣品名稱意昂4凯捷体育(中国)数字娱乐技术创新平台，並將錫箔紙放在自封袋中杏鑫平台|杏鑫娱乐-专为杏鑫提供注册登录服务的网站PG(官方电子平台)有限公司-China直营官方网站博天堂(918)官方网站 - 让你更精彩，自封袋外面再標記上樣品名稱lehu·乐虎-(88国际)官方网站有限公司PG(官方电子平台)有限公司-China直营官方网站意昂4凯捷体育(中国)数字娱乐技术创新平台，防止錫箔紙上樣品名稱模糊引起樣品混亂J9九游|会(中国)最新J.9官网网站-真人游戏第一品牌PG(官方电子平台)有限公司-China直营官方网站杏鑫平台|杏鑫娱乐-专为杏鑫提供注册登录服务的网站。
  （3）使用乙醇沈澱的核酸樣品熊猫体育【体育中国】直播平台官方网站博天堂(918)官方网站 - 让你更精彩，由于揮發出的乙醇會使記號筆的標記模糊球友(官方)App下载-球友直播意昂体育·[官方网]有限公司官网，建議用油性記號筆將樣品名稱寫在標簽紙上博天堂(918)官方网站 - 让你更精彩球友(官方)App下载-球友直播意昂4凯捷体育(中国)数字娱乐技术创新平台，然後用透明膠帶將標簽紙粘貼在樣品管壁上意昂4凯捷体育(中国)数字娱乐技术创新平台杏耀_杏耀娱乐登录_杏耀注册代理平台官网，並纏繞2-3圈意昂4凯捷体育(中国)数字娱乐技术创新平台。
  （4）樣品名稱建議使用“字母+數字”命名方式標注在管蓋J9九游|会(中国)最新J.9官网网站-真人游戏第一品牌意昂体育·[官方网]有限公司官网意昂4凯捷体育(中国)数字娱乐技术创新平台。其他信息如日期、濃度、物種等可標注在管壁杏耀_杏耀娱乐登录_杏耀注册代理平台官网。所有標注內容需與《樣品信息單》保持一致PG(官方电子平台)有限公司-China直营官方网站意昂4凯捷体育(中国)数字娱乐技术创新平台。