一、支持樣本類型

二、送樣建議

• 樣本類型	送樣量/樣	保存條件	運輸條件
  OCT包埋塊	樣本厚度大于1mm九游会·J9-中国官方网站|真人游戏第一品牌球客岛-专业体育赛事直播资讯平台，面積小于6.5*6.5mm	-80℃冰箱保存星空·全站体育APP(集团)官方版球客岛-专业体育赛事直播资讯平台，包埋盒外標注切割面	幹冰運輸

• 1.冷凍OCT包埋組織塊送樣要求

  冷冻OCT包埋组织块-80℃密封保存乐天堂fun88·（官网）娱乐中心 -我的账户球客岛-专业体育赛事直播资讯平台B·体育【中国官】B-sports登录入口，幹冰運輸寄送（组织块保存时间建议3个月以内九游会·J9-中国官方网站|真人游戏第一品牌，以质检结果RIN≥6为合格标准）乐天堂fun88·（官网）娱乐中心 -我的账户lehu国际乐虎(China)-官方平台网站。
  建議組織截面積盡量不要超過所選的芯片捕獲框規格lehu国际乐虎(China)-官方平台网站，即< 6.5mm*6.5mm
  新鲜或冷冻组织直接进行包埋的操作方法见：附件1：新鮮或冷凍組織OCT包埋方法
  对新鲜组织先进行冷冻保存（暂不包埋）的操作方法见：附件2：新鮮組織凍存操作方法

• 2.多組織同時包埋操作方法

  爲提升芯片點陣利用效率zoty中欧·(中国有限公司)官方网站，對于有些較小的組織類型lehu国际乐虎(China)-官方平台网站beat·365(中文)-唯一官方认证网站，可以選擇將多個組織同時包埋在一起U8国际「强保障平台,让娱乐更有趣!」lehu国际乐虎(China)-官方平台网站，切片貼片後beat·365(中文)-唯一官方认证网站918博天堂(中国区)-官方网站，實現一個芯片點陣鋪貼多個組織B·体育【中国官】B-sports登录入口。進行此類包埋時需要注意以下幾個方面：
  2.1 为确保组织切片不超过点阵大小lehu国际乐虎(China)-官方平台网站，同时不同组织间互不影响918博天堂(中国区)-官方网站，多块组织放置时总长×宽 ≤6.5*6.5mmbeat·365(中文)-唯一官方认证网站九游会·J9-中国官方网站|真人游戏第一品牌B·体育【中国官】B-sports登录入口，两块组织间距需大于 1mmzoty中欧·(中国有限公司)官方网站U8国际「强保障平台,让娱乐更有趣!」。
  2.2 为保证切片时不同组织的关注区域均能被同时切到乐天堂fun88·（官网）娱乐中心 -我的账户九游会·J9-中国官方网站|真人游戏第一品牌，多块组织需要被包埋在同一水平面九游会·J9-中国官方网站|真人游戏第一品牌U8国际「强保障平台,让娱乐更有趣!」，同时关注的切面方向要保证一致beat·365(中文)-唯一官方认证网站zoty中欧·(中国有限公司)官方网站。
  2.3 为确保后续实验顺利开展beat·365(中文)-唯一官方认证网站，同一包埋块中的组织取样方法必须一致九游会·J9-中国官方网站|真人游戏第一品牌乐天堂fun88·（官网）娱乐中心 -我的账户zoty中欧·(中国有限公司)官方网站，组织类型及组织亚型必须相同（例如早期-胃体癌-腺癌）九游会·J9-中国官方网站|真人游戏第一品牌918博天堂(中国区)-官方网站，以保证同一包埋块内的所有组织的透化时间一致星空·全站体育APP(集团)官方版。
  2.4 除以上注意事项外星空·全站体育APP(集团)官方版beat·365(中文)-唯一官方认证网站，多个组织包埋方法与单个组织操作相同zoty中欧·(中国有限公司)官方网站。 图1 多组织同时包埋操作方法

• 3、空間轉錄組和单细胞转录组联合取样操作方法

  针对同时开展空間轉錄組和单细胞轉錄組測序实验的情况球客岛-专业体育赛事直播资讯平台B·体育【中国官】B-sports登录入口，需要在取样时同时制备两份以上样本球客岛-专业体育赛事直播资讯平台乐天堂fun88·（官网）娱乐中心 -我的账户，操作如下：
  3.1手术取样后zoty中欧·(中国有限公司)官方网站918博天堂(中国区)-官方网站B·体育【中国官】B-sports登录入口，将组织分别按照空間轉錄組和单细胞转录组要求的大小分为三份：
  ①空間轉錄組要求：长×宽 ≤ 6.5mm×6.5mm918博天堂(中国区)-官方网站球客岛-专业体育赛事直播资讯平台beat·365(中文)-唯一官方认证网站，高度≥1mm;
  ②单细胞要求：大于200mg 的组织（黄豆粒大行强铡と�站体育APP(集团)官方版。�;
  ③建議保留備份樣本；
  Notice：單細胞實驗過程默認使用全部組織乐天堂fun88·（官网）娱乐中心 -我的账户，如有特殊需求球客岛-专业体育赛事直播资讯平台B·体育【中国官】B-sports登录入口乐天堂fun88·（官网）娱乐中心 -我的账户，務必提前告知zoty中欧·(中国有限公司)官方网站U8国际「强保障平台,让娱乐更有趣!」。
  3.2 将取好的空間轉錄組样本放入有盖培养皿或其它密闭容器在湿冰上转移至实验室U8国际「强保障平台,让娱乐更有趣!」918博天堂(中国区)-官方网站beat·365(中文)-唯一官方认证网站，后续严格按照上述方法进行组织包埋或者冻存乐天堂fun88·（官网）娱乐中心 -我的账户九游会·J9-中国官方网站|真人游戏第一品牌球客岛-专业体育赛事直播资讯平台。
  3.3 将取好的单细胞转录组样本放在 RPMI-1640 (Fisher Scientific) 培养基中置于冰上转运至实验室球客岛-专业体育赛事直播资讯平台beat·365(中文)-唯一官方认证网站zoty中欧·(中国有限公司)官方网站，用 PBS 洗掉组织中的血液beat·365(中文)-唯一官方认证网站zoty中欧·(中国有限公司)官方网站，后续严格按照“諾禾致源单细胞样本寄送说明文档”进行操作；
  3.4 为防止样本混淆九游会·J9-中国官方网站|真人游戏第一品牌zoty中欧·(中国有限公司)官方网站B·体育【中国官】B-sports登录入口，造成不必要的麻烦九游会·J9-中国官方网站|真人游戏第一品牌星空·全站体育APP(集团)官方版，制备好的空間轉錄組样本与单细胞样本建议分开寄送U8国际「强保障平台,让娱乐更有趣!」乐天堂fun88·（官网）娱乐中心 -我的账户。
  3.5 为保证单细胞实验质量星空·全站体育APP(集团)官方版918博天堂(中国区)-官方网站，单细胞实验樣本類型依次推荐顺序为（新鲜样本悬液制备>新鮮樣本提核>冷凍樣本提核）
  3.6 如果收集的样本为小鼠模型样本U8国际「强保障平台,让娱乐更有趣!」九游会·J9-中国官方网站|真人游戏第一品牌lehu国际乐虎(China)-官方平台网站，当单只小鼠样本量不足时918博天堂(中国区)-官方网站，则可以选择同时建模的两只或多只小鼠样本分别按照空間轉錄組和单细胞转录组要求取样；

三、保存及運輸

附件1：新鮮或冷凍組織OCT包埋方法

• 2.1 所需试剂及耗材

  名稱	廠商	貨號	備注
  OCT 组织包埋剂	日本櫻花SAKURA	PN-4583	濕冰或4℃冰箱預冷≥30min
  組織包埋盒	/	/	包埋盒大蠦·体育【中国官】B-sports登录入口球客岛-专业体育赛事直播资讯平台。�17*17*5mm
  幹冰	/	/	将幹冰尽量敲碎
  醫用鑷子	/	/	使用前幹冰预冷≥30min
  鋒利刀片	/	/	使用前幹冰预冷≥30min
  實驗用吸水紙	/	/

  Notice：所需試劑耗材B·体育【中国官】B-sports登录入口，均由客戶自行准備

• 2.2 准备工作

  2.1 将幹冰盒中的幹冰尽量敲碎星空·全站体育APP(集团)官方版，将镊子、刀片等工具放置在幹冰上预冷30min以上lehu国际乐虎(China)-官方平台网站。
  2.2 将OCT包埋剂放入湿冰中预冷beat·365(中文)-唯一官方认证网站，预冷30min以上乐天堂fun88·（官网）娱乐中心 -我的账户，（或可放入4℃冰箱中预冷）
  2.3 准备好冷冻組織包埋盒B·体育【中国官】B-sports登录入口球客岛-专业体育赛事直播资讯平台，记号笔标注好样品信息及方向B·体育【中国官】B-sports登录入口球客岛-专业体育赛事直播资讯平台。
  Tips① 使用太小的組織包埋盒九游会·J9-中国官方网站|真人游戏第一品牌beat·365(中文)-唯一官方认证网站，容易使包覆样本的OCT包埋剂过少zoty中欧·(中国有限公司)官方网站lehu国际乐虎(China)-官方平台网站，可能造成组织裸露球客岛-专业体育赛事直播资讯平台，从而影响组织RNA质量beat·365(中文)-唯一官方认证网站U8国际「强保障平台,让娱乐更有趣!」球客岛-专业体育赛事直播资讯平台。
  
  
  图1 试剂耗材预冷、包埋盒标记

• 3.取樣

  3.1 尽量收集新鲜组织样本918博天堂(中国区)-官方网站B·体育【中国官】B-sports登录入口，避免室温长时间放置918博天堂(中国区)-官方网站U8国际「强保障平台,让娱乐更有趣!」lehu国际乐虎(China)-官方平台网站，避免污染； 临床样本建议将组织放在干净的离心管或密封袋中918博天堂(中国区)-官方网站乐天堂fun88·（官网）娱乐中心 -我的账户，埋入湿冰中短暂保存和运输（小于30 min）星空·全站体育APP(集团)官方版U8国际「强保障平台,让娱乐更有趣!」乐天堂fun88·（官网）娱乐中心 -我的账户。
  3.2 使用實驗用吸水紙吸干组织表面血渍或水渍zoty中欧·(中国有限公司)官方网站B·体育【中国官】B-sports登录入口lehu国际乐虎(China)-官方平台网站，尽量避免使用PBS或组织清洗液润洗组织U8国际「强保障平台,让娱乐更有趣!」B·体育【中国官】B-sports登录入口beat·365(中文)-唯一官方认证网站，新鲜组织样本截面大小应不超空間轉錄組检测捕获框检测面积乐天堂fun88·（官网）娱乐中心 -我的账户星空·全站体育APP(集团)官方版九游会·J9-中国官方网站|真人游戏第一品牌。高度≥1mm乐天堂fun88·（官网）娱乐中心 -我的账户九游会·J9-中国官方网站|真人游戏第一品牌，如样本过大乐天堂fun88·（官网）娱乐中心 -我的账户，建议在速冻前先将组织分割成多个小块乐天堂fun88·（官网）娱乐中心 -我的账户，样本过大可能会导致组织冷冻不均匀zoty中欧·(中国有限公司)官方网站球客岛-专业体育赛事直播资讯平台。
  Tips① 如组织样本表面较软zoty中欧·(中国有限公司)官方网站U8国际「强保障平台,让娱乐更有趣!」，不易修剪星空·全站体育APP(集团)官方版，可提前将锡箔纸铺到幹冰上B·体育【中国官】B-sports登录入口，将组织放到锡箔纸上进行预冷星空·全站体育APP(集团)官方版乐天堂fun88·（官网）娱乐中心 -我的账户918博天堂(中国区)-官方网站，表面稍许变硬后再进行修剪；
  Tips② 如样本较薄B·体育【中国官】B-sports登录入口星空·全站体育APP(集团)官方版乐天堂fun88·（官网）娱乐中心 -我的账户，可同时制备包埋多份样本zoty中欧·(中国有限公司)官方网站918博天堂(中国区)-官方网站乐天堂fun88·（官网）娱乐中心 -我的账户，以保证样本足够用于质检、透化和正式实验；
  Tips③ 如样本较厚beat·365(中文)-唯一官方认证网站B·体育【中国官】B-sports登录入口，需准备高度适宜的包埋盒或将一个包埋盒底部去除beat·365(中文)-唯一官方认证网站球客岛-专业体育赛事直播资讯平台乐天堂fun88·（官网）娱乐中心 -我的账户，再将另一个包埋盒与其进行叠放球客岛-专业体育赛事直播资讯平台，以增加样品包埋高度；
  
  图2 吸水纸组织表面清理、包埋盒底部去除

• 4.包埋

  4.1 将組織包埋盒放到幹冰盒内lehu国际乐虎(China)-官方平台网站beat·365(中文)-唯一官方认证网站，向包埋模具内注入少量经过湿冰预冷的OCT918博天堂(中国区)-官方网站，注意不要产生气泡九游会·J9-中国官方网站|真人游戏第一品牌乐天堂fun88·（官网）娱乐中心 -我的账户。
  4.2 将上述修剪好的组织块或冰冻组织找好角度九游会·J9-中国官方网站|真人游戏第一品牌乐天堂fun88·（官网）娱乐中心 -我的账户球客岛-专业体育赛事直播资讯平台，水平放置在組織包埋盒中918博天堂(中国区)-官方网站beat·365(中文)-唯一官方认证网站。
  4.3 继续注入 OCT 包埋液直至整个组织块被完全包埋zoty中欧·(中国有限公司)官方网站。
  Tips① 自中心点沿时针方向连续轻柔挤出beat·365(中文)-唯一官方认证网站B·体育【中国官】B-sports登录入口乐天堂fun88·（官网）娱乐中心 -我的账户，可有效避免气泡的产生星空·全站体育APP(集团)官方版zoty中欧·(中国有限公司)官方网站，如产生气泡球客岛-专业体育赛事直播资讯平台beat·365(中文)-唯一官方认证网站B·体育【中国官】B-sports登录入口，可用镊子或细枪头将气泡挑破或向外侧挤出zoty中欧·(中国有限公司)官方网站U8国际「强保障平台,让娱乐更有趣!」星空·全站体育APP(集团)官方版。
  Notice：將所關注的切面平行于包埋盒底部進行包埋918博天堂(中国区)-官方网站，關注的切面朝下放置zoty中欧·(中国有限公司)官方网站，我司實驗室收到樣品後按照平行于包埋盒底部的角度進行切片zoty中欧·(中国有限公司)官方网站，如有特殊情況需提前告知beat·365(中文)-唯一官方认证网站球客岛-专业体育赛事直播资讯平台。

• 5.速凍

  組織包埋盒继续放置在幹冰上并盖上幹冰盒盖子beat·365(中文)-唯一官方认证网站球客岛-专业体育赛事直播资讯平台星空·全站体育APP(集团)官方版，速冻 10min-20min 直至包埋剂变硬变白lehu国际乐虎(China)-官方平台网站U8国际「强保障平台,让娱乐更有趣!」。
  
  图3 OCT包埋冷冻

• 6.保存

  包埋后的组织固定在包埋盒中九游会·J9-中国官方网站|真人游戏第一品牌球客岛-专业体育赛事直播资讯平台乐天堂fun88·（官网）娱乐中心 -我的账户，转入自封袋内标记好送样信息即可幹冰寄送样本zoty中欧·(中国有限公司)官方网站星空·全站体育APP(集团)官方版。如暂不送样U8国际「强保障平台,让娱乐更有趣!」，则需要将包埋块密封好后放在 -80℃冰箱中冻存B·体育【中国官】B-sports登录入口918博天堂(中国区)-官方网站beat·365(中文)-唯一官方认证网站。
  Notice： 必須密封儲存樣本九游会·J9-中国官方网站|真人游戏第一品牌，否則可能會導致組織脫水和損傷beat·365(中文)-唯一官方认证网站。

附件2：新鮮組織凍存操作方法

• 2.1 所需试剂及耗材

  名稱	廠商	貨號	備注
  異戊烷	Sigma	270342
  液氮	/	/
  幹冰	/	/	将幹冰尽量敲碎
  液氮及異戊烷容器	/	/	/
  醫用鑷子	/	/	使用前幹冰预冷≥30min
  鋒利刀片	/	/	使用前幹冰预冷≥30min
  實驗用吸水紙	/	/

  Notice：所需試劑耗材zoty中欧·(中国有限公司)官方网站，均由客戶自行准備

• 2.2 准备工作

  2.1 幹冰盒中的幹冰尽量敲碎球客岛-专业体育赛事直播资讯平台，将镊子、刀片等工具放置在幹冰上预冷30min以上B·体育【中国官】B-sports登录入口九游会·J9-中国官方网站|真人游戏第一品牌。
  2.2 将OCT包埋剂放入湿冰中预冷球客岛-专业体育赛事直播资讯平台B·体育【中国官】B-sports登录入口，预冷30min以上beat·365(中文)-唯一官方认证网站，（或可放入4℃冰箱中预冷）918博天堂(中国区)-官方网站星空·全站体育APP(集团)官方版球客岛-专业体育赛事直播资讯平台。
  2.3 准备金属容器球客岛-专业体育赛事直播资讯平台U8国际「强保障平台,让娱乐更有趣!」，在金属容器中倒入2/3体积的異戊烷918博天堂(中国区)-官方网站乐天堂fun88·（官网）娱乐中心 -我的账户，再将金属器皿放在液氮中918博天堂(中国区)-官方网站B·体育【中国官】B-sports登录入口lehu国际乐虎(China)-官方平台网站，制备成異戊烷液氮浴装置乐天堂fun88·（官网）娱乐中心 -我的账户星空·全站体育APP(集团)官方版，異戊烷在液氮中预冷10-15min乐天堂fun88·（官网）娱乐中心 -我的账户beat·365(中文)-唯一官方认证网站zoty中欧·(中国有限公司)官方网站。
  Tips① 異戊烷液氮浴装置中乐天堂fun88·（官网）娱乐中心 -我的账户，液氮和異戊烷处于同一水平线；
  Tips② 異戊烷预冷时间长会出现结冰情况beat·365(中文)-唯一官方认证网站，如未满15min即出现结冰现象918博天堂(中国区)-官方网站beat·365(中文)-唯一官方认证网站zoty中欧·(中国有限公司)官方网站，则可以缩短预冷时间lehu国际乐虎(China)-官方平台网站乐天堂fun88·（官网）娱乐中心 -我的账户星空·全站体育APP(集团)官方版，当異戊烷结冰时星空·全站体育APP(集团)官方版球客岛-专业体育赛事直播资讯平台918博天堂(中国区)-官方网站，可将異戊烷从液氮中取出室温放置一小段时间lehu国际乐虎(China)-官方平台网站U8国际「强保障平台,让娱乐更有趣!」B·体育【中国官】B-sports登录入口。
  
  图4 異戊烷液氮浴装置

• 3.取樣

  取樣過程同“一、新鮮或冷凍組織OCT包埋方法“

• 4.冷凍

  4.1 用镊子将组织放入異戊烷918博天堂(中国区)-官方网站球客岛-专业体育赛事直播资讯平台星空·全站体育APP(集团)官方版，完全浸入液面1min至完全冷冻球客岛-专业体育赛事直播资讯平台星空·全站体育APP(集团)官方版，冷冻时间根据组织类型和大小而有所不同zoty中欧·(中国有限公司)官方网站。
  4.2 冷冻后B·体育【中国官】B-sports登录入口beat·365(中文)-唯一官方认证网站，迅速将组织转移到提前预冷的低温冷冻管中U8国际「强保障平台,让娱乐更有趣!」球客岛-专业体育赛事直播资讯平台，并放置在幹冰上九游会·J9-中国官方网站|真人游戏第一品牌。
  Notice：請不要直接使用液氮對組織進行速凍球客岛-专业体育赛事直播资讯平台zoty中欧·(中国有限公司)官方网站乐天堂fun88·（官网）娱乐中心 -我的账户，組織表面與液氮的巨大溫差會導致液氮在組織表面沸騰918博天堂(中国区)-官方网站，可能會導致氣泡空腔或不均勻冷凍星空·全站体育APP(集团)官方版，最終影響組織形態九游会·J9-中国官方网站|真人游戏第一品牌球客岛-专业体育赛事直播资讯平台lehu国际乐虎(China)-官方平台网站。
  图5 低温冻存管保存组织

• 5.保存

  将放入冷冻管内的冷冻组织密封好放入样本存放盒或密封袋中lehu国际乐虎(China)-官方平台网站乐天堂fun88·（官网）娱乐中心 -我的账户U8国际「强保障平台,让娱乐更有趣!」，标记好样本信息九游会·J9-中国官方网站|真人游戏第一品牌U8国际「强保障平台,让娱乐更有趣!」，放在 -80℃长期保存918博天堂(中国区)-官方网站。开展实验前球客岛-专业体育赛事直播资讯平台乐天堂fun88·（官网）娱乐中心 -我的账户，可将冷冻样本取出后按照“一、新鮮或冷凍組織包埋操作方法” 的流程完成樣本包埋工作九游会·J9-中国官方网站|真人游戏第一品牌zoty中欧·(中国有限公司)官方网站。

附件3：送樣地址